宣肺中药对小鼠肠道传输功能减缓的调节作用(2)
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参见附件(4963KB，7页)。
1.4 检测项目
1.4.1 一般情况 观察小鼠的活动度、精神状况、毛发光泽度及饮食情况等。
1.4.2 排便实验观察 于第7天给药结束后30min，给予各组动物已配制好的5%活性炭悬液(5%炭末与10%阿拉伯树胶)，每只0.2mL，将小鼠放入铺有滤纸的鼠笼内，每笼放小鼠1只，并正常供给饲料和饮水，同时开始准确计时。观察记录每只小鼠首次排出含炭粉黑便粪便的时间，连续观察4h，记录4h内小鼠总排便粒数，并称量。
1.4.3 小肠炭末推进率检测 各组于末次给药后，禁食12h，以5%活性炭悬液(5%炭末与10%阿拉伯树胶)灌胃，每只0.2mL， 25min后立即脱颈椎处死动物，迅速打开腹腔，分离小肠，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠铺平成直线，不牵拉。测量肠管长度为小肠总长度，从幽门至炭末前沿为炭末推进长度，按公式计算炭末推进率(炭末推进率( %) 炭末推进长度÷小肠总长度×100 %)。
1.5 统计方法
采用SAS 8.2软件进行数据统计分析，多组均数比较用单因素方差分析法。结果以均数±标准差(±s)表示，标准水平取α0.05，P<0.05为差异有显著性意义。
2 结 果
2.1 一般情况
正常组小鼠体胖、行动活跃、精神良好、皮毛润泽、饮食不减。模型组小鼠见皮毛色泽发黄、无光泽伴竖毛，活动减少、蜷曲蹲伏，纳差，精神萎靡，粪便质地坚硬，干燥。药物干预组小鼠上述改变有所减轻。
2.2 排便实验观测
与正常组相比，模型组小鼠首粒黑便时间延长，4h排便粒数、4h排便重量明显减少，差异有显著意义(P<0.05或P<0.01)。与正常组相比，模型给药组首粒黑便时间缩短，4h排便粒数、4h排便重量增加(P<0.05)。见表1。
表1 各组小鼠排便情况比较(n8，±s)
注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，＃P<0.05。
2.3 小肠炭末推进率
模型组小鼠小肠炭末推进率降低，与正常组比较差异有显著意义(P<0.05或P<0.01)。模型给药组小鼠小肠炭末推进率升高，与模型组比较有显著差异(P<0.05)，提示加味桔梗汤能增强便秘小鼠胃肠运动能力，缓解运动功能受限及排便障碍。正常组与正常给药组小鼠在小肠炭末推进率方面差异无显著性。见表2。
表2 各组小鼠小肠炭末推进率比较(n8，±s)
注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，＃P<0.05。
3 讨 论
便秘是临床常见病、多发病，长期便秘不仅使患者生活质量下降，甚至可加重胃肠功能紊乱，形成恶性循环。《诸病源候论·大便不通候》云：“大便不通者，由三焦五脏不合，冷热之气不调，热气偏入肠胃，津液竭燥，壅塞不通也。”可见便秘发病与饮食、情志、生活习惯、工作、年龄等多种因素相关，其主要病理变化在肠，临床多从通下论治，但长期使用通下之法，往往会对机体带来许多不良的影响。
“肺合大肠”出自《黄帝内经》，《灵枢·本输》曰：“肺合大肠，大肠者，传导之腑。”肺居胸中，其经下络大肠，与大肠相表里。二者生理上相互协调、相互为用，病理上亦相互影响、相互传变。正可谓“大肠之所以能传导者，以其为肺之腑，肺气下达，故能传导”、“肺与大肠相表里，肺遗热于大肠则便结，肺气不降则便结”(清·唐容川《血证论》)。基于以上认识，有学者提出便秘当重视调理肺气，临床上灵活选用宣肺、肃肺、清肺、补肺、润肺等法辨证论治，疗效确切【sup】【/sup】[3-4，7]。
目前，国内外便秘动物模型的制作主要通过口服复方地芬诺酯【sup】[5]【/sup】、接触性泻剂大黄和酚酞【sup】[8]【/sup】及阿密曲替林【sup】[9]【/sup】等造成动物排便次数减少、便干等症状来实现，这些方法均采用一次性给药，不影响动物的生理功能，属于非特异性便秘模型，在便秘实验研究中应用广泛。为复制出与临床便秘症状相似，并具有中医病因病机学特点的实热便秘模型，本课题组在参考文献基础上，采用自身粪便与复方地芬诺酯灌胃法建立小鼠复合便秘模型。结果表明，模型小鼠皮毛色泽发黄、蜷曲蹲伏、纳差、粪便质地坚硬，干燥；首粒黑便时间延长，4h排便粒数、4h排便重量、小肠炭末推进率均减少(P<0.01或P<0.05)，提示自身粪便与复方地芬诺酯灌胃，可导致小鼠肠道传输减缓，排便困难，形成具有实热特点的便秘模型。
在此基础上，本课题组进行了从肺论治便秘的干预研究，所选方剂加味桔梗汤由桔梗、甘草、浙贝、紫苑等组成，方中桔梗开宣肺气，肺气宣发则腹气通畅；浙贝性寒味苦，能清能散，以扭转便秘所致的肺气壅滞；紫菀性温而润，长于开泄肺郁，故其能润大便燥结，开发宣通壅滞；甘草清热解毒，又有调和之能，全方共奏宣肺降气、清热开郁之功。结果表明：药物干预后，小鼠首粒黑便时间减少，4h排便粒数、4h排便重量、小肠炭末推进率增加(P<0.05)。由此可见，病理状态下，运用加味桔梗汤对便秘小鼠从肺进行干预，可有效地增加大肠传导之效，促进便秘模型小鼠肠道传输功能，改善排便障碍，但其效应是如何实现的尚需深入研究，本课题组将从神经肽角度进一步探讨“肺合大肠”理论的现代生物学机制。
参考文献
[1] 毛旭明,周阿高,李琰,等.中医药治疗功能性便秘文献的荟萃分析[J].世界中西医结合杂志，2009,4(12)：850-852.
[2] 董艳，陆金根.中医药诊治便秘概述[J].医学信息,2009，22(11):2601-2603.
[3] 郑丰勋,李炜弘,严石林,等.便秘从肺论治[J].国医论坛，2003,18(3)：16-17.
[4] 蔡德光. 宣肺润肠汤治疗老年性便秘100例临床观察[J] ......
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