1.2.3 c-DNA的逆转录合成 根据RT-PCR试剂盒说明书进行逆转录反应。

    1.2.4 引物的合成 所有引物均为Primer 5.0设计并由上海生工生物技术公司合成。DNMT1引物序列为：上游5’- CACCATCACGGCTCACTTC-3’，下游5’-GGCCCGCTGTTACCTCTTC-3’，产物长度为182 bp；CD11a引物序列为：上游5’- TCTGCCTATGACCACAACA-3’，下游5’-TCTCCCACCTGAAGACAAT-3’，产物长度为211 bp；GAPDH引物序列为：上游5’-CACCATCTTCCAGGAGC GAG-3’，下游5’-GCAGGTTTCTCCAGGCGG-3’，产物长度为537 bp。

    1.2.5 半定量PCR反应条件 PCR 反应体系总体积为25μL，将反应物于94℃预变性5min后，于94℃变性30s，其中DNMT1产物于55℃退火；CD11a产物于58℃退火；GAPDH产物于55℃退火，72℃延伸45s，进行35次循环(其中GAPDH产物进行30次循环)，最后于72℃延伸10min。

    1.2.6 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳、凝胶成像和凝胶图像分析 反应产物行1.5%琼脂糖凝胶电泳, 显色条带经图像分析系统检测其灰度值 ......