电针督脉和膀胱经对实验性抑郁症大鼠行为学及海马NSE表达的影响(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
1.6 取材 各组到达实验设计的时间点，即造模结束后的第21天，用3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉，迅速将大鼠固定在脑立体定位仪上，在对耳线6.2mm，前囟后2.8mm处进行脑冠状切并取脑，石蜡包埋后进行免疫组化染色。
1.7 免疫组化方法 石腊先脱腊进水，以10%正常血清作用10min，阻断切片对蛋白质非特异性吸附，NSE单克隆一抗(BSA稀释至1：800)，以0.05mol/L PBS(pH 7.4内含0.1%TritonX-100，下同)洗5×3min(洗3次，每次5min)，加入FITC标记的二抗在室温下反应lh，PBS洗10×3min，以缓冲甘油封盖，在Olympus FV 500荧光显微镜下观察，计算各组的NSE阳性细胞数目。
1.8 统计学处理 采用SPSS 11.5统计软件分析计量结果，用均数±标准差表示)，对计量资料进行完全随机设计的单因素方差分析，对资料方差齐性进行Levene检验，按α=0.10水准，若方差齐，则应用Least Significant difference t检验(LSD-t检验)来判断差异的统计学意义，P<0.05认为差异具有显著性意义；按α=0.10水准，若方差不齐，则应用Cochran & Cox近似t检验来判断差异的统计学意义，P<0.05认为差异有显著性意义。
2 实验结果
2.1 对抑郁症大鼠旷场法行为学测定水平运动的作用
与空白组相比，模型组大鼠水平活动于造模结束后第7天明显下降(P=0.038559，P<0.05)；第14、21天，模型组与正常组比较有显著性差异(P=0.002972～0.007153，P<0.01)。第14天电针1、2组大鼠水平活动较模型组有显著提高(P=0.000514～0.000848，P<0.01)；第21天，电针1、2组大鼠水平运动均较模型组有显著提高(P=0.000469～0.001042，P<0.01)。见表1。
2.2 对抑郁症大鼠旷场法行为学测定垂直运动的作用
与空白组相比，模型组大鼠垂直活动于造模结束后第14、21天出现显著性差异(P=0.000000～0.000031，P<0.01)。与模型组相比，第14天电针2组垂直活动积分升高有显著性差异(P=0.000078，P<0.01)；电针1组大鼠到第21天，垂直活动均较模型组有显著提高(P=0.000000，P<0.01)见表2。
2.3 对抑郁症大鼠糖水消耗量的影响
与空白组相比，造模结束后第7天，模型组和各电针组大鼠的糖水消耗量无显著性差异(P=0.155974-0.863573，P>0.05)。第14天，模型组大鼠的糖水消耗量与空白组相比明显减少(P=0.005374，P<0.01)；电针1、2组糖水消耗量较模型组增多(P=0.014585～0.014903，P<0.05)。第21天，模型组糖水消耗量仍较空白组明显减少(P=0.036952，P<0.05)；电针1、2组的糖水消耗量增加，与模型组比较均有明显差异(P=0.042745，P<0.05；P=0.008931，P<0.01)。见表3。
2.4 电针对实验性抑郁症大鼠体重增加克数的影响
结果发现，与空白组相比,模型组大鼠体重增加克数显著下降(P=0.021315)；与模型组大鼠相比电针1组、2组体重增加数显著增加(P=0.000294-0.000367)，但电针1组、2组体重增加数无显著性差异(P=0.701283)。见表4。
2.5 电针对实验性抑郁症大鼠海马各区神经元数目变化的影响
与空白组相比，模型组海马神经元数目显著减少(P=0.000386～0.005813，P<0.01)；与模型组相比，电针1组、2组大鼠海马CA1、CA3及齿状回(DG)神经元数目显著增加(P=0.000638～0.039176)；与电针1组相比，电针2组大鼠海马齿状回(DG)神经元数目显著增加(P=0.036815，P<0.05)。见表5。
3 讨 论
现代研究发现,应激性生活事件是抑郁症的明显促发因素[8]，紧张性生活事件越多,抑郁症的发病率就越高，症状也就越重。因此，以应激(尤其是慢性不可预知的应激)模拟造成抑郁症的环境来制作抑郁动物模型，能较为真实的模拟抑郁病人的某些症状：如运动能力及社会交往能力下降、对奖赏的反应性下降,即快感缺乏[9]、探索行为能力下降、侵犯攻击能力缺陷、性行为能力下降等。本实验利用慢性应激结合孤养造成大鼠的抑郁状态模型，体重增长缓慢，在规定时间内的水平运动减少，反映了动物活动度的降低；垂直运动得分降低，反映了动物对新鲜环境的好奇程度减低；奖赏反应程度降低，即快感缺乏；造模结束后21天模型组大鼠仍保持这种行为学改变。可见，模型大鼠表现出的抑郁状态、活动能力下降、兴趣丧失、快感缺乏与抑郁症临床表现中的精神运动性阻抑症状极为相似，且这种抑郁状态可保持较长时间，故此种造模方法可用于研究抑郁症[10]。
抑郁症的致病原因迄今尚不清楚[11]。目前比较一致的观点认为抑郁症的发生与神经元再生障碍密切相关[1]。在正常成年哺乳动物脑中，明显的神经元再生主要集中于嗅球系统和海马齿状回[3，12]。海马作为学习、记忆以及引起情感障碍的关键脑区，每天大约有9000个新神经元产生。研究证明，在成年哺乳动物海马脑区神经元再生的减少和增多分别是导致抑郁症发生和恢复的重要因素[3]。因此抑郁症作为一种神经退行性疾病，神经元再生无疑为其治疗靶标的选择提供了一个新的视角，促进海马神经元再生是治疗抑郁和焦虑的新策略[13]。实验发现，电针组大鼠海马各区神经元数量均较同期模型组有所增加，可见，电针可以减轻大鼠海马神经元的损伤，促进抑郁的改善。
根据“脑主神明”理论，现代认为抑郁症病机核心在于脑窍郁闭，神机失运。故临床上使用针刺督脉穴位治疗取得较好疗效[14]。督脉直接入属于脑，与足太阴经、足厥阴经、冲任二脉及心肾等脏腑在经络上有广泛的络属，抑郁症的睡眠障碍、言语动作减少或迟缓，多与督脉经气运行不畅有关。足太阳经交于督，通行阳气，散心络脑，调养元神，且其背俞经气，主调脏腑。根据“脑与五脏六腑相互为用”的特点，结合督脉与膀胱经的密切关系，我们选用督脉百会、神庭和足太阳经的心俞、肝俞治疗抑郁症 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2531kb)。