低浓度红细胞尿液的两种检测方法比较与分析
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【摘要】目的:尿液红细胞(BBC)检测是对肾和泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断，对病情严重程度、疗效和预后观察都有极为重要的价值，本文研究了低浓度红细胞尿液中使用不离心法尿液直接镜检计数红细胞的可能性。方法:使用离心和不离心两种方法对低浓度红细胞(≤100/μl)尿液进行红细胞镜检计数。结果:不离心镜检计数与理论定值比较接近，平均偏差-5.82%；但离心法镜检计数结果是理论定值的一半左右，平均偏差达-46.15%。结论:在尿液红细胞浓度较低时，不离心镜检计数比离心镜检计数更能敏感、准确地放映红细胞实际浓度。
【关键词】离心；尿红细胞；细胞计数；尿沉渣
【中图分类号】R446.12
【文献标识码】A【文章编号】1009-6019(2009)-04-0157-1
尿液红细胞(BBC)检测是对肾和泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断，对病情严重程度、疗效和预后观察都有极为重要的价值。正常人尿中排出红细胞甚少，偶然一次离心尿内可不见或偶见红细胞，24h尿中排出的红细胞数不超过100万。离心后的尿液，每高倍视野平均可见到1～2个红细胞为异常表现。本文使用离心和不离心两种方法对低浓度红细胞(≤100/μl)尿液进行红细胞镜检计数，结果报告如下。
一、材料与方法
1.材料(1)标本来源：本院门诊病人正常尿液；正常人全血。(2)仪器器材：Olympus显微镜；LDZ5-2低速自动平衡离心机；FAST-READ10一次性尿沉渣计数板。
2.方法(1)不同浓度红细胞成分的尿液标本的制备：选择EDTA-K2抗凝的新鲜正常的全血样本1份，用血细胞分析仪(使用校准品校准)测量红细胞数值，使用正常人混合尿液(收集多人尿液，用高速离心方法去除细胞等有形成分，留取上清夜)将红细胞含量配制成10/μl、25/μl、50 /μl 、100/μl四个浓度。配制好的含红细胞的尿液标本分别用离心镜检法和不离心镜检法计数红细胞数量。
(2)离心镜检法：按全国临床检验操作规程方法进行，取混匀的尿液标本10ml于一次性尿沉渣专用离心管内，以1500r/min,离心5分钟，吸掉上清夜，留取管底0.2ml沉渣，充分混匀后用一次性塑料吸管滴入FAST-READ10一次性尿沉渣计数板的计数池内，稍待片刻，首先用低倍镜观察细胞分布情况，再用高倍镜计数全池9个大方格内的红细胞数。红细胞含量(细胞数/μl) =(9个大方格的红细胞数/9)×10÷50。
(3)不离心镜检法：将配制好的红细胞尿液充分混匀，用一次性塑料吸管吸取滴入FAST-READ10一次性尿沉渣计数板的计数池内，稍待片刻，首先用低倍镜观察细胞分布情况，再用高倍镜计数全池9个大方格内的红细胞数。红细胞含量(细胞数/μl) =(9个大方格的红细胞数/9)×10
(4)以上两种方法，每管都重复充液计数6次，取平均值。所有检测均在样本配制后2h内完成。
二、结果
不离心镜检计数与理论定值比较接近，平均偏差-5.82%；但离心法镜检计数结果是理论定值的一半左右，平均偏差达-46.15%。见表1。两法相比，t=2.52，P<0.05，结果有显著性差异。
三、讨论
尿沉渣的显微镜检查是识别尿有形成分的标准，主要有离心镜检法和不离心镜检法两种。当尿液红细胞较多时，离心沉淀反而不利镜检计数，尿沉渣检验实际无需离心，这已为检验人员所公认。许多研究显示，在尿红细胞中高浓度时，离心法结果与真实结果存在明显的差异，离心法结果明显低于不离心法，不离心直接计数与真实值更加接近。离心的目的是浓缩有形成分，防止漏检。但本研究显示即使在低浓度下离心法的计数结果仍然明显低于真实值，而不离心法与真实值较为接近，与丛玉隆等在高浓度下的研究结果一致。
离心使红细胞计数偏低的原因主要可能有以下几个方面：(1)离心后红细胞沉淀不完全，上清夜还有红细胞；(2)离心过程中部分红细胞受到破坏；(3)离心管管壁有细胞的粘附；(4)计算时除于50这个浓缩倍数，放大了上述效应。
本研究方法参考丛玉隆等的研究方法是在没有干扰物的情况下进行的，在实际工作中是否适用，马俊龙等通过研究已经得到了肯定，认为采用新鲜尿液直接计数(扩大计数范围)是尿液有形成分计数的理想方法，而离心镜检法不适合有形成分定量分析。
综上所述，不离心法尿液直接镜检计数红细胞(扩大计数范围)在决定性水平上(高于参考值上限的低浓度)比离心镜检法更为敏感，更为准确，检出率更高；且该法操作简便，结果快速，无须昂贵仪器，值得推广。至于数到多少细胞的数量接近泊松分析能够达到准确定量计数的标准，尚需探讨。
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