贝那普利对自发性高血压大鼠心肌纤维化及心肌肿瘤坏死因子表达影响(2)
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1 材料与方法
1.1 动物与分组
16只SHR,雄性(北京维通利华实验动物有限公司),随机分为实验组(SHR-con组,n=8)和药物干预组(SHR-ben组,n=8)两组;同周龄WKY大鼠作实验对照组(WKY组,n=7)。适应性饲养1周后,SHR-ben组大鼠给予贝那普利(10 mg•kg-1•d-1)(北京诺华制药有限公司)灌胃,每日1次,其他两组用相当容量蒸馏水灌胃,每日1次。饲养过程中SHR-con组和SHR-ben组各死亡1只大鼠。
1.2 检测指标
1.2.1 血压测定及采血
3组大鼠喂养12周后测量体重,乌拉坦1 g•kg-1腹腔内注射麻醉,颈动脉插管,待血压稳定后BL-420生物机能实验系统检测颈动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP),测3次,取其均值作为该样本的血压。之后进行腹主动脉采血,试管内含有15 μl EDTA试管,离心后取血浆1 ml,加入10 μl抑肽酶,摇匀,-20 ℃保存待测TNF-α。
1.2.2 HE染色
动物处死后留取左室心肌标本2~3 mm厚,用LEICA CM1900冰冻切片机作冰冻切片(厚度15~20 μm)。取出冰冻切片,复温,置于0.01 mol•L-1枸橼酸内15 min;浸入苏木素染液,1%盐酸酒精分化,入伊红染液;梯度酒精脱水、二甲苯透明;中性树胶封片 ......
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