苍柏湿毒清对小鼠阴道解脲支原体定植干预研究
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【摘要】 目的：旨在比较苍柏湿毒清干预前、干预后小鼠Uu阴道炎造模成功率。方法：A1组先予中药干预，其后Uu阴道炎造模； B1组先予生理盐水干预，其后Uu阴道炎造模； A2组造模成功后予中药干预；B2组造模成功后给予生理盐水干预，C组既不进行造模，亦不进行中药干预，清洁级饲料喂养。计算各组小鼠Uu的定植成功率并行统计分析。结果：A1组、A2组造模成功率均低于B1组、B2组，据统计学分析P<0.05，说明组间比较有显著差异。结论：苍柏湿毒清干预前、后均能降低解脲支原体造模成功率，是针对解脲支原体感染的有效药物。
【关键词】 解脲支原体； 造模； 苍柏湿毒清
解脲支原体(Ureaplasma urealyticum Uu)目前是引起非淋菌性尿道炎、男性不育、女性不孕、宫颈炎及盆腔炎等多种疾病的主要病原体[1]。苍柏湿毒清治疗解脲支原体引起的非淋菌性尿道炎、宫颈炎临床疗效明确。本实验拟对小鼠解脲支原体感染的实验动物模型干预的研究，旨在比较苍柏湿毒清干预前、干预后小鼠解脲支原体性阴道炎造模成功率。
1实验材料
1.1实验对象
BALB/C小鼠40只，清洁级，鼠龄8～10周，体重(20±2g)，均购自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于北京中医药大学东方医院实验中心动物实验室；解脲支原体血清8型(ATCC27816)，由北京中原合聚公司代购自ATCC(美国模式培养物集存库)，复苏、传代后备用。
1.2试剂
苯甲酸雌二醇购自天津金耀氨基酸有限公司；解脲支原体液体培养基购自珠海丽珠试剂有限公司。
1.3中药苍柏湿毒清
苍柏湿毒清制剂由炒苍术、黄柏、生黄芪、柴胡等地道药材组成，制备为含生药1g/ml的水提药液，由北京中医药大学东方医院制剂室制备。A1组、A2组用药剂量：每次0.2ml，每日2次灌胃。
2实验方法
2.1动物分组
BALB/C小鼠送到饲养室后首先进行解脲支原体检测，将检测均为阴性的BALB/C小鼠40只随机分成5组，即：A1组(中药干预组)8只先给予苍柏湿毒清浓缩液灌胃，每次0.2ml，每天2次，连续7d，其后予解脲支原体性阴道炎造模4周；B1组先给予生理盐水0.2ml灌胃，每天2次，连续7d，其后予解脲支原体性阴道炎造模4周；A2组(中药干预组)8只BALB/C小鼠，先予解脲支原体性阴道炎造模4周，造模成功后给予苍柏湿毒清浓缩液灌胃，每次0.2ml，每天2次，连续7d；B2组先予解脲支原体性阴道炎造模4周，造模成功后给予生理盐水0.2ml灌胃，每天2次，连续7d；C组8只BALB/C小鼠，既不进行造模，亦不进行中药干预，清洁级饲料喂养。分好组后让其适应环境一周。
2.2菌液制备
将解脲支原体血清4型冻干菌株(ATCC27816)用液体培养基溶解稀释，在37℃条件温箱内培养24h，培养基颜色由黄变浅粉色即复苏成功，然后传代，传至第三代时配制成 105ccu/ml的浓度备用。
2.3BALB/C小鼠解脲支原体性阴道炎造模[2]
2.3.1雌二醇处理每周在BALB/C小鼠的皮下注射1次苯甲酸雌二醇注射液，0.2ml，共4次。
2.3.2菌液接种在第2次注射雌二醇后，每天用无菌输液软管向BALB/C小鼠阴道注入预先提取的Uu标准株菌液20u1(105ccu/ml)，连续注入3d。
2.3.3检测第4次注射完雌二醇后，用男用阴拭子取BALB/C小鼠阴道分泌物，放入解脲支原体鉴别培养基中在37℃条件下培养，若培养基颜色变红即表明支原体检测阳性，造模即成功。
2.4统计方法
采用SPSS19.0统计软件，计数资料采用Chi-Square Tests连续χ2检验。
3实验结果
3.1动物的一般情况
BALB/C小鼠注射雌二醇后比注射前兴奋，接种菌液后第一周精神开始萎靡不振，毛发失去光泽，进食减少；造模成功后BALB/C小鼠阴道红肿、分泌物增多；中药灌胃干预后，BALB/C小鼠精神欠佳，肢体倦卧，进食减少。
3.2支原体检测结果
4讨论
苍柏湿毒清干预前、后均能降低解脲支原体造模成功率，苍柏湿毒清是预防、治疗解脲支原体感染的有效药物，其干预解脲支原体定植的机制仍需进一步研究 ......
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