糖尿病性勃起障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌组织形态学及α—SMA表达量的变化(2)
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1.2.1糖尿病大鼠模型建立实验用大鼠均在同一环境正常饲养7d，以适应研究环境。7d后，随机将大鼠分为两组，其中观察组12只，对照组8只。建模前12h严格禁食，但是不禁水。观察组(DED组)腹腔一次性注射链脉佐菌，标准为60mg/kg；对照组一次性腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mmol/L，pH4.0)。完成建模后，所有大鼠均在无特异病原环境下喂养8周。在建模第4d和第8周，割尾法取血，并使用美国Johnson&Johnso公司生产的便携式血糖计测血糖，记录大鼠体质量。当观察组大鼠血糖值超过16.7mmol/L，即为建模成功。
1.2.2DED大鼠筛选和勃起功能测定取建模成功大鼠，于颈部皮肤松弛处皮下注射APO，标准为100μg/kg。选择安静、昏暗的环境进行勃起功能测定。勃起判断标准：大鼠阴茎头充血、露出、阴茎体增长为勃起。如在30min内未勃起，则为DED大鼠。按每千克35mg标准腹腔注射0.2%戊巴比妥麻醉大鼠。麻醉成功并固定好后，使用碘伏消毒液消毒相关部位，然后切开颈部皮肤，并让左侧颈静脉充分暴露、插管，以备补液、追加麻药。尽量暴露左侧颈总动脉，插入充满肝素的聚乙烯管，连接张力换能器，使用PowerLab/4SP系统(由澳大利亚ADInstrument公司进口)采集信号。取下腹正中切口，解剖前列腺后侧叶，并暴露海绵体神经，放置不锈钢电极。在电刺激前，需要将有针头并充满肝素的聚乙烯管插入右侧阴茎角部，并连接张力换能器，测阴茎海绵体内压。参数保持在15Hz、脉冲1.2ms，并给予2.5、5和7.5V电压刺激。每次刺激1min，每4min刺激1次。记录最大颅内无(Max ICP)及平均动脉压(MAP)，并使用Max ICP/MAP表示。
1.2.3阴茎海绵体平滑肌/胶原纤维相对含量测定完成勃起功能测定后 ......
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