重组腺病毒介导P27mt基因增强宫颈癌放疗疗效的实验研究
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【中图分类号】R711 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2013)12-0250-01
【摘要】目的 观察P27mt基因对宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用。方法 MTT法检测P27mt基因和放射线对Hela细胞的增殖抑制作用，绘制抑制率曲线图研究P27mt基因与放射联合应用时的作用特点；流式细胞法检测细胞周期和凋亡。结果 单纯照射对宫颈癌增殖有抑制作用，但有平台效应；P27mt基因对Hela细胞增殖具有明显的抑制作用，并呈时间和浓度依赖性；照射联用P27mt基因可进一步增强对宫颈癌的杀伤效应；单独照射和P27mt基因均能使细胞周期阻滞于放射敏感时相G2/M期，诱导细胞凋亡，联用效果更加显著。结论P27mt基因可通过阻滞细胞周期于G2/M期对宫颈癌Hela细胞产生放疗增敏作用。
宫颈癌是我国也是本地区最常见恶性肿瘤，放射治疗是重要治疗手段，目前多采用同步放化疗综合治疗模式，即通过同步应用小剂量化疗药物在不增加甚至降低射线剂量的基础上达到增强放射线对肿瘤细胞的杀伤作用[1] 。
p27 基因是细胞周期素依赖性激酶抑制因子(CDKI) 家族成员之一，是一类重要的细胞周期调控基因，可广泛抑制细胞周期素( cyclin) 和细胞周期素依赖性蛋白激酶(CDK) 复合物的活性对细胞周期进行负性调控[2] 。Jean 等[3] 将p27 第187 位苏氨酸置换成丙氨酸(T187A) 转染HeyC2 细胞，发现细胞生长明显抑制，证实突变p27 (p27mt) 比野生型p27 抑制作用更强。p27mt对宫颈癌放疗作用如何未见有人报道，本文对此进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料
人宫颈癌Hela细胞株和p27mt 由湖北医药学院临床研究所惠赠； Clinac 600C/D加速器( 美国Varian 公司)；流式细胞仪(美国Beckman Coluter公司)。
1.2 方法
1.2.1细胞培养 宫颈癌Hela细胞培养于含10%新生牛血清的1640中，并置于含5%C02的37℃孵箱中常规培养，每2-3d传代1次，取对数生长期细胞用于实验。
1.2.2照射方法 在室温下采用6MV-X线照射，照射野10×10cm，剂量率40 cGy/min，源皮距为100cm ......
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