过量麻醉处死，迅速断头取脑，将鼠脑立即置于-20℃冰箱中20min后取出，行2mm厚的连续冠状切片。将切片立即置于2%氯化三苯四氮唑溶液中，37℃恒温下避光染色30 min，然后置于4℃、4%多聚甲醛溶液中固定24h。正常脑组织染为红色，梗死组织为白色，测定每张脑片的梗死面积。

    1.8 RT-PCR检测 miRNA-155的表达

    采用RNA提取试剂盒提取总RNA，设计miR-155上游引物： 50-GTCGTATC CAGTGCAGGGTCCGAGG-30，下游引物：TATTCGCACTGGATACGACCCCCTA，采用RT-PCR试剂盒将RNA反转录成cDNA，统计各组间miRNA-155相对表达量。

    1.9 免疫组织化学染色法检测缺血脑皮质区CD31的表达

    取各组大鼠缺血区的脑组织，4%多聚甲醛固定。洗涤后依次乙醇梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋切片、脱蜡水合、修复抗原，内源性过氧化物酶阻断。血清封闭后加入抗CD31一抗，4℃孵育过夜。洗涤后加入生物素标记的IgG孵育10min。洗涤后加入链霉菌素亲和素过氧化物酶，室温孵育10 min。DAB染色3 min，苏木精染色10 s。1%盐酸乙醇分化2 s。用中性树脂固定后，在显微镜下观察。

    1.10 Western blotting 检测VEGF受体2(VEGFR2)和AT1R的表达

    提取脑组织蛋白用BCA法测定蛋白浓度 ......