胶体金法快速检测滴虫性阴道炎的临床应用
[中图分类号]8.711.31
[文献标识码]B
[文章编号]1672-4208(2010)02-0023-02
阴道毛滴虫感染导致的阴道炎，是妇科常见病，多发病。阴道毛滴虫主要寄生在女性泌尿生殖道，引起滴虫性阴道炎和尿道炎，是一种全球分布，以性传播为主的疾病。目前临床实验室检测主要采用直接湿片高倍镜法。但由于受温度、涂片厚薄及检验者水平的影响。其阳性诊断率较低(约50%)，易发生漏诊和误诊。为快速准确检测阴道毛滴虫感染，我们分别用胶体金法和培养法对阴道分泌物标本进行对比检测，现介绍如下。
1 材料与方法
1.1标本来源 381份阴道分泌物标本来自2007年4～11月附院妇科门诊患者，均为毛滴虫感染疑似病例，年龄在16～45岁之间，平均年龄28岁。患者有白带增多，呈白色泡沫状，稀薄有臭味，外阴瘙痒与腰痛，部分患者有尿痛、尿急、尿频等尿路感染症状。
1.2试剂材料 胶体金法试剂为阴道滴虫检测试剂盒(胶体金法)。济南杏恩生物科技有限公司提供。培养法所用培养基为大豆蛋白胨液体培养基，严格依照配方说明配制。
1.3方法原理 胶体金法利用双抗体夹心法检测标本中是否含有相应待测抗原。将抗阴道滴虫的分泌性蛋白纯化后包被在胶体金上成为金标抗体，检测时，当样品中含有阴道滴虫的分泌性蛋白时，在检测区(T区)时，形成金标抗体一抗原一抗体复合物显示红色线条，呈阳性反应。培养法是依据阴道毛滴虫的生物学特性，给以合适的营养条件，利于少量滴虫大量繁殖提高检出率。
1.4测定方法
1.4.1胶体金法 用消毒棉拭子从阴道后穹窿及阴道壁取分泌物，移入含1ml样品稀释液小管中，并且旋转混合约30s～1min，将棉拭子取出弃去。将试纸条插入小管，在规定时间读取结果。
1.4.2培养法 用消毒棉拭子从阴道后穹窿及阴道壁取分泌物移入液体培养基中，37℃温箱培养，24～48h后吸取管内沉淀物检查有无原虫生长。
2 结果
381份阴道分泌物标本共有75份培养出阴道滴虫，阳性率为19.7%。对75份阳性标本患者用胶体金法检查阳性为62份，阴性13份：在306份培养阴性非患者胶体金法检查阴性为280份，阳性26份。与培养法比较，胶体金法的敏感性为82.7%，特异性为91.5%。
3 讨论
阴道毛滴虫是一种常见的性传播疾患病原体，可引起女性阴道炎、尿道炎和男性的尿道炎、前列腺炎等病症。本病的诊断主要依靠实验室诊断，传统的湿片法由于其简便价廉，仍为大多数医院所采用，但其敏感性低。培养法以其高灵敏和高特异被誉为阴道滴虫病原学诊断的“金标准”。实验中经常采用的培养基为液体培养基，有肝-胨-麦芽糖培养基、半胱氨酸-肝-胨-麦芽糖培养基和大豆-肝-胨-麦芽糖培养基等几种，但操作复杂费时，可用于疑难病例诊断。荧光定量PCR被认为是检测阴道毛滴虫较快速、准确、高效的方法之一。这是一种对阴道毛滴虫的DNA进行定量测定的方法，敏感性和特异性分别为90.1%和100%。但设备要求条件高，价格昂贵，临床常规难以应用。近年来，新型免疫学方法的出现为阴道毛滴虫病的诊断提供了新的发展途径。方法类型有酶免疫法(EIA)、直接荧光抗体实验(DFA)、胶乳凝集试验(LAT)及斑点金免疫层析试验即胶体金法(DI-CA)。胶体金法以其简便、快速、试剂稳定及较高准确性适合临床推广使用。, 百拇医药(李军莉)
[文献标识码]B
[文章编号]1672-4208(2010)02-0023-02
阴道毛滴虫感染导致的阴道炎，是妇科常见病，多发病。阴道毛滴虫主要寄生在女性泌尿生殖道，引起滴虫性阴道炎和尿道炎，是一种全球分布，以性传播为主的疾病。目前临床实验室检测主要采用直接湿片高倍镜法。但由于受温度、涂片厚薄及检验者水平的影响。其阳性诊断率较低(约50%)，易发生漏诊和误诊。为快速准确检测阴道毛滴虫感染，我们分别用胶体金法和培养法对阴道分泌物标本进行对比检测，现介绍如下。
1 材料与方法
1.1标本来源 381份阴道分泌物标本来自2007年4～11月附院妇科门诊患者，均为毛滴虫感染疑似病例，年龄在16～45岁之间，平均年龄28岁。患者有白带增多，呈白色泡沫状，稀薄有臭味，外阴瘙痒与腰痛，部分患者有尿痛、尿急、尿频等尿路感染症状。
1.2试剂材料 胶体金法试剂为阴道滴虫检测试剂盒(胶体金法)。济南杏恩生物科技有限公司提供。培养法所用培养基为大豆蛋白胨液体培养基，严格依照配方说明配制。
1.3方法原理 胶体金法利用双抗体夹心法检测标本中是否含有相应待测抗原。将抗阴道滴虫的分泌性蛋白纯化后包被在胶体金上成为金标抗体，检测时，当样品中含有阴道滴虫的分泌性蛋白时，在检测区(T区)时，形成金标抗体一抗原一抗体复合物显示红色线条，呈阳性反应。培养法是依据阴道毛滴虫的生物学特性，给以合适的营养条件，利于少量滴虫大量繁殖提高检出率。
1.4测定方法
1.4.1胶体金法 用消毒棉拭子从阴道后穹窿及阴道壁取分泌物，移入含1ml样品稀释液小管中，并且旋转混合约30s～1min，将棉拭子取出弃去。将试纸条插入小管，在规定时间读取结果。
1.4.2培养法 用消毒棉拭子从阴道后穹窿及阴道壁取分泌物移入液体培养基中，37℃温箱培养，24～48h后吸取管内沉淀物检查有无原虫生长。
2 结果
381份阴道分泌物标本共有75份培养出阴道滴虫，阳性率为19.7%。对75份阳性标本患者用胶体金法检查阳性为62份，阴性13份：在306份培养阴性非患者胶体金法检查阴性为280份，阳性26份。与培养法比较，胶体金法的敏感性为82.7%，特异性为91.5%。
3 讨论
阴道毛滴虫是一种常见的性传播疾患病原体，可引起女性阴道炎、尿道炎和男性的尿道炎、前列腺炎等病症。本病的诊断主要依靠实验室诊断，传统的湿片法由于其简便价廉，仍为大多数医院所采用，但其敏感性低。培养法以其高灵敏和高特异被誉为阴道滴虫病原学诊断的“金标准”。实验中经常采用的培养基为液体培养基，有肝-胨-麦芽糖培养基、半胱氨酸-肝-胨-麦芽糖培养基和大豆-肝-胨-麦芽糖培养基等几种，但操作复杂费时，可用于疑难病例诊断。荧光定量PCR被认为是检测阴道毛滴虫较快速、准确、高效的方法之一。这是一种对阴道毛滴虫的DNA进行定量测定的方法，敏感性和特异性分别为90.1%和100%。但设备要求条件高，价格昂贵，临床常规难以应用。近年来，新型免疫学方法的出现为阴道毛滴虫病的诊断提供了新的发展途径。方法类型有酶免疫法(EIA)、直接荧光抗体实验(DFA)、胶乳凝集试验(LAT)及斑点金免疫层析试验即胶体金法(DI-CA)。胶体金法以其简便、快速、试剂稳定及较高准确性适合临床推广使用。, 百拇医药(李军莉)