尾加压素Ⅱ对针刺预处理I/R损伤大鼠心肌细胞血管VEGF的影响(2)
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1.3 动物分组
健康SD大鼠随机分为6组(按照《卫生统计学》随机数字表[6])，分别为正常组(A)、I/R模型组(B)、针刺预处理组(C)、针刺+尾加压素低浓度组(D)(20 pmol/kg)、针刺+尾加压素高浓度组(E)(60 pmol/kg)、血管紧张素Ⅱ特异性受体拮抗剂(Losartan氯沙坦)(F)，每组20只。
1.4 急性心肌缺血再灌注动物模型复制和评定
模型复制前先记录正常标Ⅱ导联心电图，心电图异常者淘汰不用。大鼠用乙醚麻醉后，固定于鼠台上，沿胸骨左缘剪开皮肤，用止血钳游离大鼠左侧的胸大肌，暴露左第2、3、4肋，可以清晰地看到心脏的暗影，用弯头止血钳迅速沿胸骨左缘3、4肋间分开肋骨，挤出心脏，充分暴露心脏及其表面的血管，用4/0医用缝合线在冠状动脉前降支挂线，然后迅速将心脏送回胸腔，医用缝合线的两端留置体外备用。用长嘴止血钳把胸部皮肤和肌肉以及心脏挂线夹紧，防止气胸，观察心电图变化，T波高耸或者倒置为心肌缺血标志，如心电图改变不明显，则稍稍松一点止血钳，拉紧一端线头，这时则可以明显看到心电图改变，30 min后，再灌注时，则松开止血钳，把挂线放松，形成再灌注损伤模型。从开胸到关闭胸腔，控制在1 min以内完成。
心肌缺血和再灌注模型成功指标：心电图表现为ST段抬高和(或)T波高耸或者倒置；再灌注损伤模型成功标志，再灌注后，抬高的ST段下降50%以上或高耸的T波下降，见图1~3。
1.5 电针参数
根据以往的实验方法，选取“神门”、“内关”[7]，酒精消毒所取穴位，采用0.5寸毫针，直刺3 mm，连接PCE-A电针仪，选择刺激电压5 V，电流强度1.1 mA，2 Hz，以针体微微抖动为度，每次30 min，1次/d，电针3 d。
1.6 标本采集
模型复制成功后24 h，10%水合氯醛(0.36 ml/100 g体质量)腹腔注射麻醉大鼠，取大鼠左心室心尖部缺血区心肌组织，称重，按照1︰9的比例加入生理盐水，匀浆，离心，选取上清液，制成10%的组织溶液，标记放入液氮冷藏保存待测。
1.7 统计处理
实验数据采用均数±标准差(x±s)表示，各组间均数比较采用单因素方差分析，组间均数的两两比较采用q检验法，P
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