当前位置: 首页 > 期刊 > 《医药产业资讯》 > 2008年第27期
编号:11685329
电针对脑缺氧缺血新生大鼠海马结构Nestin与Brdu表达的影响(2)
http://www.100md.com 2008年9月25日 周秀丽 范为民
第1页

    参见附件(2839KB,3页)。

     1 材料与方法

    1.1 实验分组及模型制作

    7日龄健康Wistar大鼠100只(由河南省实验动物中心提供),体重12~15 g,随机分为4组:空白对照组(25只,存活23只,颈部正中切口,不结扎左侧颈总动脉,不做低氧处理)、模型判定组(25只,存活20只)、缺氧缺血组(25只,存活22只)和缺氧缺血后电针治疗组(25只,存活24只),各组动物分别结扎左侧颈总动脉,然后将动物置于8%O2-92%N2混合气中2 h 后取出,具体步骤参照文献[4]。

    1.2 标本制作与染色

    模型判定组动物在缺氧缺血48 h后处死,制备脑片及脑组织切片,应用TTC及HE染色判定模型是否成功,具体步骤参照文献[4]。脑缺氧缺血后电针组在缺氧缺血后恢复2 d,开始刺激“百会”和“大椎”两穴。将针柄分别连接至电刺激仪的电极上(电针刺激参数:频率16 Hz,强度10 mV),留针10 min,治疗2个疗程,每个疗程10 d,两疗程间间隔2 d,穴位定位、针刺参数及疗程参照文献[1,5,6]。24 d后除模型判定组外各组动物分别灌注取左侧脑组织,常规石蜡包埋、切片,行Nestin和Brdu免疫组化染色,光镜下观察海马结构的阳性细胞分布、计数定量分析,除模型判定组外各组动物于处死前2 d的电针治疗前及处死前2 h,分别注射Brdu以标记处于增殖状态的神经前体细胞。Brdu溶于0.01 mol/L PBS中,注射前配制,按50 mg/kg体重腹腔注射。

    1.3 统计学方法

    数据以均数±标准差(x±s)表示。先对每组数据做正态性检验,再做方差齐性检验。若方差齐,则做单因素方差分析和q检验;若方差不齐,则进行变量转换。使用SPSS 10.0统计软件对数据进行分析,P<0.05表示差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 TTC功能性酶组织染色

    模型判定组动物的脑片经TTC功能性酶组织化学染色后,其左侧大脑半球的大部分脑实质着色浅呈苍白色,而右侧大脑半球染成深红色,提示模型成功。

    2.2 Nestin免疫组织化学染色

    高倍镜下(10×40倍视野)Nestin免疫阳性细胞呈纤维状,胞体较小,突起且较少,可见明显的锥状突起,染色较淡。细胞计数显示,脑缺氧缺血组和脑缺氧缺血后电针组海马CA1区Nestin免疫阳性细胞均较正常对照组增多,脑缺氧缺血后电针组海马CA1区Nestin免疫阳性细胞较脑缺氧缺血组增多,两两比较差异均有统计学意义(P

您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件(2839KB,3页)