不同诱导方法对赤子爱胜蚓中的金属硫蛋白的影响(2)
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Table 1 Contents comparison of protein and sulfhydryl
标准曲线计算公式：Y=0.010 9X+0.035，其中Y为595 nm处的A值，X为100 μl粗提液中含有蛋白的微克数。
3 讨论
3.1 MT含量测定
MT的含量检测方法大多是建立在MT的理化特性和免疫学特性基础上的[7]，这些检测方法主要有四类：①金属亲和检测。主要通过测定MT结合金属的量来计算MT所占的比例。如Hg结合法、Cd血红蛋白饱和法以及Ag饱和法等。②检测巯基含量，以测定巯基来计算MT含量。主要是用经典的生化巯基测定法。③蛋白质的检测。通过MT多克隆和单克隆抗体，利用免疫学方法:如放射免疫分析法(RIA)和酶联免疫吸附分析法(ELISA)。④其他。本文通过测定巯基来计算MT含量，简单方便。
3.2 金属硫蛋白诱导条件的选择
许多金属能诱导MT的合成，例如Cu、Au、Zn、Hg、Cd、Co、Ni和Al等，其他的诱导因素还包括饥饿、光照等[8,9]。本文根据实际条件选择Zn、饥饿、振荡、光照诱导蚯蚓产生MT。由结果可知，其中锌诱导产生的金属硫蛋白含量最高。由文献表明，金属离子是通过增加MT的基因转录而影响MT的合成的，MT基因5'端基因启动区至少存在两个基因调控片段，它们分别与金属和糖皮质激素诱导MT的合成有关。
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(收稿日期：2008-10-27)
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