VEGF在卵巢癌组织中的表达及临床意义(2)
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1.3.2 免疫组织化学法按照SABC试剂盒的操作步骤进行。结果判定:以细胞质棕黄色染色为阳性细胞。高倍镜下取3个不同视野各计数100个细胞。按无阳性细胞、阳性细胞数<30%、阳性细胞数30%～50%、阳性细胞数>50%分为(-)、(+)、(++)、(+++)四级。(++)、(+++)者为免疫组化阳性表达。
1.4 统计学方法
数据以均数±标准差(x±s)表示,用SPSS 13.0软件包进行统计学处理,计量资料采用t检验和单因素方差分析,计数资料用χ2检验及线性相关分析,检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 正常卵巢组织及卵巢癌组织中VEGF mRNA的表达
VEGF mRNA(258 bp)、GAPDH(482 bp)与标准分子相对质量条带显示清楚(图1),电泳所得PCR产物经序列测定证实为目的基因。正常卵巢组织VEGF mRNA相对表达量为(0.19±0.12)。卵巢癌组织VEGF mRNA相对表达量为(0.62±0.23),明显高于对照组(P<0.05),卵巢癌组织中不同临床病理指标间VEGF mRNA表达见表1。
图1 卵巢癌组织中VEGF琼脂糖凝胶电泳结果
表1 卵巢癌组织中VEGF mRNA相对表达量与
临床病理指标的关系(x±s)
2.2 正常卵巢组织及卵巢癌组织中VEGF蛋白的表达
正常卵巢组织及卵巢癌组织中VEGF蛋白的表达情况见表2、图2,卵巢癌组织中不同临床病理指标间VEGF蛋白表达见表3。
表2 正常卵巢组织及卵巢癌组织中VEGF蛋白的表达情况
3 讨论
实体瘤的快速增长和转移离不开血管生成,其中VEGF发挥重要作用。VEGF是血管内皮特异性的有丝分裂原,对血管内皮细胞的增殖、水解基膜、迁移和血管构建的调控作用较强[2-4]。VEGF可增加血管的渗透性,使包含基质形成因子的血浆蛋白外渗,为肿瘤转移提供基质。恶性肿瘤普遍表现为VEGF的过度表达,VEGF在肿瘤细胞与血管内皮细胞都有明显的阳性表达[5]。
研究表明,VEGF在卵巢癌组织中高水平表达,表达率为77.8%,与盆腔淋巴结的转移呈正相关,提示在肿瘤生长过程中,VEGF表达增加,导致血管形成加快,出现大量结构和功能异常的肿瘤血管,形成转移,其阳性表达率还与肿瘤细胞有丝分裂活性呈正相关,故可将VEGF作为一个反映卵巢肿瘤恶性程度的生物学指标[6-12]。
本研究采用RT-PCR法检测卵巢癌组织和正常卵巢组织中的VEGF表达。结果提示,卵巢癌组织中VEGF mRNA表达量明显高于正常卵巢组织,其表达量随临床分期、淋巴结转移增加而增高。免疫组化法检测到VEGF蛋白在卵巢癌组织中的阳性率显著高于正常卵巢组织。另外,在VEGF mRNA高表达卵巢癌组织中,其蛋白表达水平亦明显升高,VEGF mRNA和蛋白表达具有明显相关性(P=0.011),表明VEGF通过促进血管形成,在卵巢癌发生、转移过程中发挥重要作用。
[参考文献]
[1]刘雄光.血管内皮生长因子在头颈部肿瘤的表达及意义[J].山东大学耳鼻喉眼学报,2007,21(1):4-6.
[2]Lee JK, Hong YJ, Han CJ, et al. Clinical usefulness of serum and plasma vascular endothelial growth factor in carcinoma patients: which is the optimal specimen [J]. Int J Oncol,2000,17(2):149-152.
[3]Yabushita H, Shimazu M, Noguchi M, et al. Vascular endothelial growth factor activating matrix metalloproteinase in ascitic fluid during peritoneal dissemination of ovarian carcinoma [J]. Oncol Rep,2003,10:89-95.
[4]Shinkaruk S, Bayle M, Lain G, et al. Vascular endothelial cell growth factor (VEGF), an emerging target for carcinoma chemotherapy [J] ......
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