6His-hVEGF165融合基因真核表达载体的构建和鉴定(3)

http://www.100md.com 2010年3月5日 张显玉,王 涛,陈伟华,庞 达

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    参见附件。

     2.5 构建和鉴定pcDNA6-hVEGF165

    2.5.1 目的片断的获取

    用BamHⅠ、XhoⅠ将hVEGF165自pMD19-T-hVEGF165切下,琼脂糖凝胶电泳后,切胶回收目的片断,回收产物凝胶电泳结果见图6。用BamHⅠ、XhoⅠ酶切pcDNA6/His A,琼脂糖凝胶电泳后,切胶回收目的片断,回收产物凝胶电泳结果见图7。

    图6目的片断回收后电泳结果

    [M1:DNA Marker(Hind Ⅲ单酶切的λ-DNA,由上到下分别为23 130 bp、9 416 bp、6 557 bp、4 361 bp、2 322 bp);1:pcDNA6/His A vector;M2:DL2000 DNA Marker;2:hVEGF165片断]

    Fig.6 Result of electrophoresis of objective fragment

    [M1: DNA Marker (λ-DNA single enzyme cutting with Hind Ⅲ, the strips from top to bottom were 23 130 bp, 9 416 bp, 6 557 bp, 4 361 bp and 2 322 bp respectively); 1: pcDNA6/His A vector; M2: DL2000 DNA Marker; 2: hVEGF165 fragment]

    2.5.2 重组质粒pcDNA6-hVEGF165的酶切鉴定

    将hVEGF165定向克隆到真核表达载体pcDNA6/His A中 ......

    http://www.100md.com/html/paper/1673-0089/2010/07/09-2.htm

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