黄芪治疗荨麻疹机制的实验研究(1)
| 第1页 |
参见附件。
[摘要] 目的:观察黄芪对大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)的抑制作用,初步探讨其治疗荨麻疹的可能机制。方法:建造同种大鼠PCA模型,实验动物随机分为模型组、酮替酚组、黄芪组,分别给予相应药物灌胃给药,采用HE染色法、甲苯胺蓝染色法、分光光度计比色法观察大鼠PCA及肥大细胞脱颗粒情况。结果:黄芪可减轻大鼠PCA,减少肥大细胞脱颗粒。结论:黄芪对大鼠PCA有抑制作用,其可能的作用机制为抑制肥大细胞脱颗粒,减少炎症介质的释放。
[关键词] 黄芪;荨麻疹;被动皮肤过敏反应;抑制作用;肥大细胞脱颗粒
[中图分类号] R758.24[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2010)03(c)-033-02
Experimental study of mechanism of Astragalus in treating urticaria
WU Lingxia, ZHEN Li
(Department of Dermatology, the First Affiliated Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China)
[Abstract] Objective: To investigate the effects and mechanism of Astragalus on urticaria by using experimental animal model of PCA. Methods: Rat models of PCA were established, then the rats were randomly divided into model group, Ketotifen group and Astragalus group. Corresponding medicines were injected into their stomachs to carry on the experiment. The PCA and degranulation of mast cells were observed with HE, toluidine blue and spectrophotometer. Results: Astragalus could decrease the PCA reaction, and decreased the degranulation of mast cells. Conclusion: Astragalus can decrease the PCA reaction, and its possibled mechanism is decreasing the degranulation of mast cells and reducing production of active mediator.
[Key words] Astragalus; Urticaria; PCA; Inhibition; Degranulation of mast cell
黄芪(Astragacus,AS)是多年生豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根[1],始载于《神农本草经》,以补中益气、升举清阳为主要功效,是补气的要药[2]。我科运用黄芪治疗荨麻疹疗效确切,但其作用机制尚不清楚。本实验旨在进一步观察黄芪对大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)的抑制作用,初步探讨其可能的机制,从而为临床用药提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物
Wistar大鼠35只,体重(160±20) g,雌雄兼用,购自山西医科大学生理实验室,分笼饲养于山西医科大学生理实验室。
1.2 药物与试剂
卵清蛋白(Sigma公司,批号A5253),白百破疫苗(武汉生物制品研究所,批号20080516-4),黄芪(豪州市万珍中药饮片厂,批号081226),富马酸酮替酚片(海南制药厂有限公司制药一厂,批号081101),伊文思蓝,甲苯胺蓝。
1.3 仪器
低速离心机SC-3610(科大创新股份有限公司中佳分公司),721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
1.4 实验方法
1.4.1 动物分组Wistar大鼠30只,随机分为模型组、酮替酚组、黄芪组。模型组:生理盐水2 ml/只;酮替酚组:0.7 mg/kg;黄芪组:5 g/kg。
1.4.2 大鼠同种PCA模型的构建及处理各组药物均配制成2 ml溶液,灌胃给药,每天1次,连续7 d,第5天给药后在大鼠背中线两侧选取致敏点。取卵蛋白IgE抗血清生理盐水溶液(1∶1),于皮内注射0.1 ml/点。末次给药后1 h进行抗原攻击:即尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液1 ml(内含卵清蛋白30 mg)。30 min后将动物处死,分离背部皮肤。
1.4.3 蓝色反应斑光密度值测定将蓝斑剪下,剪碎,加入丙酮-生理盐水(7∶3)混合液4 ml,浸泡,离心,取上清液于721型分光光度计610 nm处测定光密度值(OD值),取各组的平均光密度值,计算出抑制率。
抑制率=(1-用药组平均光密度值/模型组平均光密度值)×100%
1.4.4 病理组织学变化标本固定,常规石蜡包埋,切片,苏木素-伊红染色,光镜下观察皮肤组织病理学变化。
1.4.5 脱颗粒肥大细胞计数组织切片常规脱蜡,1%甲苯胺蓝染色,0.5%冰醋酸分化,显微镜下观察控制呈色,透明,封片。每张切片选取3个肥大细胞分布相对较多的视野,高倍镜下计数100个肥大细胞中的脱颗粒细胞数,计算脱颗粒百分率及抑制率。
肥大细胞脱颗粒率(%)=脱颗粒细胞数/肥大细胞总数×100%
肥大细胞脱颗粒抑制率(%)=(1-用药组脱颗粒率/模型组脱颗粒率)×100%
1.5 统计学处理
数据以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 病理组织学变化
光镜下模型组主要表现为真皮水肿,皮肤毛细血管及小血管扩张充血,淋巴管扩张及炎症细胞轻度浸润,水肿在真皮上部最明显。黄芪组及酮替酚组炎症程度均有改善。
2.2 黄芪对大鼠PCA的抑制作用(表1)
由表1可知,黄芪能够抑制大鼠同种PCA,与酮替酚比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
表1黄芪对大鼠PCA OD值的影响(x±s)
与模型组比较,*P<0.05
2.3 黄芪对肥大细胞脱颗粒的影响(表2)
正常的肥大细胞结构完整,圆形,显蓝色,边缘光滑,胞质内充满粗大的紫红色颗粒。模型组肥大细胞肿胀、变形,边缘不齐,胞膜破裂,颗粒脱出。由表2可知,与模型组比较,酮替酚组与黄芪组肥大细胞脱颗粒数明显减少(P<0.05),黄芪组与酮替酚组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
表2 黄芪对大鼠皮肤组织肥大细胞脱颗粒的影响(x±s)
与模型组比较,*P<0.05
3 讨论
荨麻疹是由于皮肤黏膜小血管扩张及通透性增加而出现的一种局限性的水肿反应,15%～20%的人一生中至少发作一次[3],且易反复发作,严重影响了患者的身心健康。荨麻疹的病因复杂,约3/4的患者找不到原因,故很难达到病因治疗。中医药治疗荨麻疹的疗效越来越受到国内外学者的充分肯定,但目前文献报道大多限于临床经验的总结,而在机制阐述方面尚需进一步发展。本实验通过大鼠同种被动皮肤过敏反应实验,证明黄芪对荨麻疹有抑制作用。
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。