流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病诊断中的应用(2)
1.2 嗜碱性粒细胞及嗜碱性粒细胞活化试验
1.2.1 嗜碱性粒细胞 嗜碱粒细胞由CD34+的多能干细胞分化而来，迁移至骨髓中成熟，在外周白细胞中占不到1%[1]，其胞浆中含有嗜碱性颗粒，可贮存并释放大量的组织胺、IL-4和IL-3，以及大量的白三烯C4及L1、B4[5-6]。与肥大细胞相似，常被认为是“循环中的肥大细胞”。嗜碱性粒细胞是参与过敏反应的效应细胞之一。当受到特定变应原刺激后，嗜碱性粒细胞活化，从而同时启动脱颗粒及合成新介质两个平行过程，其中嗜碱性粒细胞脱颗粒后会释放出组胺、趋化因子、肝素等介质；同时嗜碱性粒细胞膜磷脂降解，继而释放花生四烯酸。
1.2.2 嗜碱性粒细胞活化试验 嗜碱性粒细胞活化时，其表面的一些分子发生变化，从而可以采用流式细胞术加以分析。方法步骤是：在100 μL肝素化血液中加入20 μL刺激缓冲液在37℃下孵育10 min。将过敏原、具有趋化作用的多肽以及抗IgE抗体作为正控制，添加的洗涤液为负控制。置于冰箱冷却5 min，终止嗜碱性粒细胞脱颗粒。随后，细胞与被PE标记的抗IgE抗体以及被FITC标记的抗CD63抗体结合 ......
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1.2.1 嗜碱性粒细胞 嗜碱粒细胞由CD34+的多能干细胞分化而来，迁移至骨髓中成熟，在外周白细胞中占不到1%[1]，其胞浆中含有嗜碱性颗粒，可贮存并释放大量的组织胺、IL-4和IL-3，以及大量的白三烯C4及L1、B4[5-6]。与肥大细胞相似，常被认为是“循环中的肥大细胞”。嗜碱性粒细胞是参与过敏反应的效应细胞之一。当受到特定变应原刺激后，嗜碱性粒细胞活化，从而同时启动脱颗粒及合成新介质两个平行过程，其中嗜碱性粒细胞脱颗粒后会释放出组胺、趋化因子、肝素等介质；同时嗜碱性粒细胞膜磷脂降解，继而释放花生四烯酸。
1.2.2 嗜碱性粒细胞活化试验 嗜碱性粒细胞活化时，其表面的一些分子发生变化，从而可以采用流式细胞术加以分析。方法步骤是：在100 μL肝素化血液中加入20 μL刺激缓冲液在37℃下孵育10 min。将过敏原、具有趋化作用的多肽以及抗IgE抗体作为正控制，添加的洗涤液为负控制。置于冰箱冷却5 min，终止嗜碱性粒细胞脱颗粒。随后，细胞与被PE标记的抗IgE抗体以及被FITC标记的抗CD63抗体结合 ......
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