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编号:12625521
替米沙坦对血管紧张素Ⅱ所致血管内皮细胞游离钙离子的抑制作用(2)
http://www.100md.com 2015年1月25日 中国医药导报2015年第3期
     1.3.2 治疗性实验 将接种于35 mm细胞培养皿中的血管内皮细胞分为5组:正常对照组、AngⅡ 0.1 μmol/L组,AngⅡ+替米沙坦60、300、1000 μg/L组。试验添加药物前每组分别测定初始钙离子浓度(0 h),设为T0。随后,除正常对照组外,其余各组加入 0.1 μmol/L的AngⅡ 10 μL培养30 min后检测细胞内游离钙离子浓度(T1),再加入替米沙坦(加入浓度和体积同“1.3.1”项下),并分别继续共同培养,于替米沙坦加入后瞬时(T2)、0.5 h(T3)、2 h(T4)、8 h(T5)和24 h(T6)抽样检测细胞内游离钙离子浓度。

    1.4 胞浆游离钙离子浓度测定[9]

    按照检测时间,分别取各组细胞应用激光共聚焦扫描显微镜调节激发波长为488 nm,发射波长为526 nm,置负载Fluo-3的内皮细胞于镜下,于每个检测时点,每组随机选取活细胞8个,各细胞共扫描16次,每次扫描间隔时间为2 s,取16次扫描测得的平均荧光强度数值作为该内皮细胞内钙离子浓度值。

    1.5 统计学方法

    应用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析 ......
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