程序性细胞死亡因子4与细胞色素C在上皮性卵巢癌中的表达及其关系(2)

http://www.100md.com 2015年5月25日 中国医药导报2015年第15期

     1 材料与方法

    1.1 标本采集

    收集2010年1月～2015年1月年菏泽市立医院妇科62例手术切除的卵巢癌标本，所有标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋，切成4 μm厚连续切片以备免疫组织化学和病理分析使用。62例患者中，年龄35～69岁，分化程度：高分化腺癌21例，中分化腺癌16例，低分化腺癌25 例。根据国际妇产科学联盟2000年的手术-病理分期，Ⅰ期10例，Ⅱ期25例，Ⅲ期22例，Ⅳ期5例。所有患者术前均未接受放疗和化疗。

    1.2 主要试剂

    兔抗人PDCD4 抗体购于上海安妍责任有限公司及兔抗人Cyt C抗体购于上海万疆生物技术有限公司。PV-6001试剂盒购于北京欣兴唐生物科技有限公司。

    1.3 实验方法

    1.3.1 免疫组化染色 采用免疫组化非生物素二步法。染色步骤按照试剂盒说明书进行。

    1.3.2 免疫组化结果判断 由两名病理科医生双盲下在显微镜下观察每张组织切片的显色反应，以胞浆或胞核出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性细胞 ......