结肠癌及癌前病变中APRIL和caspase—3蛋白的表达及其作用(2)

http://www.100md.com 2016年5月15日 《中国医药导报》2016年第14期

     1 材料与方法

    1.1 一般材料

    收集2009年8月～2015年4月东莞市石碣医院和广州市暨南大学附属一院病理科的手术切除或结肠镜活检切除标本，其中正常结肠黏膜25例，结肠腺瘤伴轻、中、重度不典型增生组织各25例，结肠癌40例。所有标本均经病理学诊断证实。

    1.2 方法

    采用免疫组化SP法检测APRIL和caspase-3的表达。caspase-3山羊抗人多克隆抗体(工作浓度1∶50)均购自美国cell signal公司，单克隆抗体APRIL购自Abcam公司。SP试剂盒、DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，严格按照试剂盒的操作程序说明进行操作步骤。染色结果判断：caspase-3定位于肿瘤细胞胞浆和胞膜内，APRIL表达于肿瘤细胞胞浆或者胞膜，呈黄色或棕黄色颗粒状。以每张切片的表达阳性肿瘤细胞的染色强度和阳性细胞率计分之和进行判定结果。染色强度：无色记0分，浅黄色记1分，棕黄色记2分，棕褐色记3分；阳性细胞率：≤5%计0分；6%～25%记1 分；26%～50%记2 分；51%～100%记3 分。将两项评分相加 ......