吉西他滨、顺铂及香菇多糖对Lewis肺癌细胞株抑制作用的实验研究(2)

http://www.100md.com 2016年9月15日 《中国医药导报》2016年第26期

     1 材料与方法

    1.1 药物与主要试剂

    吉西他滨为江苏豪森药业股份有限公司产品，批号为140310；顺铂为江苏豪森药业股份有限公司产品，批号为150402；香菇多糖为江苏康缘药业股份有限公司产品，批号为150807；Lewis肺癌细胞购于中国科学院(上海)细胞库；胎牛血清为杭州四季青生物工程研究所产品；DMEM培养液购自上海一飞生物技术有限公司；0.25%胰酶为Hyclone公司产品；二甲基亚砜(DMSO)和噻唑蓝(MTT)试剂盒为Sigma公司产品。

    1.2 细胞系及培养

    在37°C、5%CO2的培养箱中，用含1%双抗(青霉素100 kU/L、链霉素100 kU/L)，10%胎牛血清的DMEM培养基培养Lewis肺癌细胞株，2～3 d换液1次，倒置显微镜观察生长情况，当细胞密度达到70%～80%时用0.25%胰酶消化，以1∶3比例传代。取对数生长期细胞用于实验。

    1.3 细胞增殖检测(MTT法)

    取对数生长期的Lewis肺癌细胞调整浓度至5×104个细胞/mL，接种于96孔板，每孔180 μL，置于37°C、5%CO2细胞培养箱中培养4 h，分为空白对照组(仅含培养基)、对照组(细胞+培养基)和各种不同浓度药物的实验组 ......