人脐血CD34+细胞在NOD/SCID小鼠免疫重建及其抗HBV作用的初步探讨
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赵琪 刘勇 程健 严晓敏 吴超 南京大学医学院附属鼓楼医院感染科;南京大学医学院附属鼓楼医院科研部;
【摘要】目的:探讨NOD/SCID(nonobes ediabetic/severe combined immunodeficient)小鼠移植人脐带血(human umbilical cord blood,HUCB)CD34+细胞后免疫重建的特性。建立hu-NOD/SCID人鼠嵌合模型并观察其人源化免疫细胞在小鼠体内的生长分化特性、存活时间及其对HBV感染的清除作用。方法:1.NOD/SCID小鼠于Co603.5Gy照射后24h内尾静脉输注HUCBCD34+细胞;2.以流式细胞技术鉴定小鼠外周血中CD45+,CD3+,CD19+,CD56+等人源化细胞的比例;3.NOD/SCID小鼠于移植后第4wk注射HBV感染者血清并以未移植的NOD/SCID小鼠作为对照,注射同等量的患者血清;4.于感染后1、7、10、15天采血,免疫荧光定量PCR方法分别检测其HBV-DNA含量。结果:1.HUCBCD34+细胞移植后第2wk,在小鼠外周血中检测出的CD3+CD8+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD19+B细胞、CD56+NK细胞的比例分别为18.6%、16.1%、13.1%和27.8%,各细胞比例随小鼠周龄而变化。所有移植小鼠存活时间均达9wk;2.移植后小鼠感染HBV血清后,病毒仅在感染后第一天检出,随后消失;未移植CD34+细胞的小鼠外周血HBV-DNA一直维持在103水平;结论:1.NOD/SCID小鼠经射线照射后移植HUCBCD34+细胞,在不加任何刺激因子的情况下小鼠可以长时间存活并重建免疫;2.hu-NOD/SCID人鼠嵌合模型小鼠免疫成功重建后,对HBV感染有快速的清除作用。
【关键词】 人脐血 CD+细胞 HBV NOD/SCID小鼠
【基金】卫生部科研项目资助课题(WKJ2006-2-9)
【分类号】R512.62
前言人脐带血(hum an um bilicalcord blood,H U CB)因其造血干细胞含量丰富,作为干细胞另一移植的来源,已日益受到各国学者重视。而N O D/SCID(nonobese diabetic/severe com binedim m unodeficient)小鼠的出现又为移植提供了一个极好的受体。但脐带血造血干细胞(CD34+细胞
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摘要 目的：探讨NOD/SCID(nonobese diabetic/severe combined immunodeficient)小鼠移植人脐带血(human umbilical cord blood，HUCB)CD34+细胞后免疫重建的特性。建立hu-NOD/SCD人鼠嵌合模型并观察其人源化免疫细胞在小鼠体内的生长分化特性、存活时间及其对HBV感染的清除作用。方法：1.NOD/SCID小鼠于Co60 3.5Gy照射后24h内尾静脉输注HUCBCD34+细胞：2.以流式细胞技术鉴定小鼠外周血中CD45+，CD3+，CD19+，CD56+等人源化细胞的比例；3.NOD/SCID小鼠于移植后第4wk注射HBV感染者血清并以未移植的NOD/SCID小鼠作为对照，注射同等量的患者血清；4.于感染后1、7、10、15天采血，免疫荧光定量PCR方法分别检测其HBV-DNA含量。结果：1.HUCB cD34+细胞移植后第2wk，在小鼠外周血中检测出的CD3+CD8+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD19+B细胞、CD56+NK细胞的比例分别为18.6%、16.1%、13.1%和27.8%，各细胞比例随小鼠周龄而变化。所有移植小鼠存活时间均达9wk；2.移植后小鼠感染HBV血清后，病毒仅在感染后第一天检出，随后消失；未移植CD34+细胞的小鼠外周血HBV-DNA一直维持在103水平；结论：1.NOD/SCID小鼠经射线照射后移植HUCB CD34+细胞，在不加任何刺激因子的情况下小鼠可以长时间存活并重建免疫；2.hu-NOD/SCID人鼠嵌合模型小鼠免疫成功重建后，对HBV感染有快速的清除作用。
关键词：人脐血；CD34+细胞；HBV；NOD/SCID小鼠
中图分类号：R512.6+2 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2008)10-1813-03
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