重组腺病毒载体表达的α干扰素对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的抑制作用
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李广明 李玉峰 王先炜 杜以军 白娟 姜平 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室;
【摘要】目的:研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新的防治方法。方法:利用表达猪α干扰素的重组腺病毒(rAd-IFNα),通过病毒滴度、间接免疫荧光试验和实时定量RT-PCR检测,在Marc-145细胞上观察其对高致病性PRRSV SY0608株的复制抑制作用。结果:将rAd-IFNα接种细胞后24 h,再感染PRRSV,可以有效阻止PRRSV造成的细胞病变,PRRSV滴度和mRNA水平明显降低;该抑制作用随rAd-IFNα接种剂量的增加而增强,但随病毒培养时间延长而逐渐减弱。此外,将PRRSV感染细胞后24 h,再接种rAd-IFNα,仍可以有效降低PRRSV滴度和mRNA水平,并且rAd-IFNα对PRRSV传统毒株S1株同样具有明显的抑制作用。结论:rAd-IFNα可以有效抑制PRRSV在Marc-145细胞上复制,为PRRSV的防治提供了理论依据。
【关键词】 猪呼吸与繁殖综合征病毒 重组腺病毒 α干扰素
【基金】江苏省科技攻关项目(BE2007342) 国家科技支撑计划(2007BAD86B02-3,2006BAD06A04) 教育部博士点基金项目(20060307007)
【分类号】S858.28;Q789
前言猪繁殖与呼吸综合征病毒(P R--RSV)，属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属，为有囊膜的单股正链RNA病毒，基因组全长约15kb，有9个开放性阅读框架(ORFs)，其中ORFla和ORFlb编码病毒的RNA聚合酶ORFZ至O盯7位于基因组3‘端，编码P双Sv的结构蛋自{’周该病毒可引起母猪晚期流产、
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前言
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)，属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属，为有囊膜的单股正链RNA病毒，基因组全长约15kb，有9个开放性阅读框架(ORFs)，其中ORFla和ORFlb编码病毒的RNA聚合酶。ORF2至ORF7位于基因组3’端，编码PRRSV的结构蛋白。该病毒可引起母猪晚期流产、早产、产死胎、木乃伊胎等繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率。不同PRRSV毒株间存在基因变异，且抗原性和毒力也存在差异，而且PRRsV感染猪体后可产生持续感染。PRRS弱毒苗虽然可以提供部分的保护力，但存在毒力返强的危险。灭活苗使用虽然安全，但不能保证有效为动物群体提供免疫保护。干扰素(interferon，IFN)是一类具有广谱抗病毒、调节细胞生长、刺激免疫反应等多种功能的细胞因子。猪IFN-α具有显著的抗病毒功能，可能是一种防治PRRSV的有效工具。本研究利用重组腺病毒表达的猪α干扰素，通过体外实验证明，可以有效地抑制PRRSV的复制，从而为该病的防治提供了理论依据。
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