裂解型布鲁氏菌噬菌体的分子特征研究
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朱才众 熊鸿燕 崔步云 任谦 朴东日 马翔宇 第三军医大学预防医学院流行病学教研室;中国疾病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室;
【摘要】目的:研究布鲁氏菌噬菌体Tb(Tbilisi)的形态学和分子生物学特征。方法:采用透射电镜观察噬菌体颗粒形态,双层琼脂法观察噬斑形态,梯度密度离心纯化噬菌体颗粒,提取噬菌体基因组,采用多种限制性内切酶(S1,DNase I,RNase A,BamHI)对基因组进行酶切琼脂糖凝胶电泳,SDS-PAGE观察噬菌体颗粒全蛋白片段。结果:Tb噬菌体电镜下显示头部直径为57±2nm,短尾(32±3nm长),分类学属于短尾噬菌体科。培养48小时后显示清晰噬斑,大小为2～3mm。核酸结构分析均表明Tb噬菌体基因组为线性dsDNA分子。基因组DNA经限制性内切酶BamHI酶切产生2条清晰条带,分子量在34.5kb左右。SDS-PAGE全蛋白电泳显示Tb噬菌体含有9条主要结构蛋白。结论:该研究证实了Tb噬菌体属于短尾病毒科噬菌体,对宿主菌存在裂解效应并产生2～3mm清晰透亮形态的噬斑,基因组为dsDNA分子,全蛋白包含9条主要的结构蛋白。该研究结果为布鲁氏菌噬菌体的分子水平的研究提供了新的研究基础。
【关键词】 布鲁氏菌噬菌体 形态学 分子特征
【基金】“十一五军队医学科技项目”(06MA198) “国家自然科学基金(NSFC)”(30571637)
【分类号】Q939.4
前言在20世纪50年代,前苏联发现第一株稳定的布鲁氏菌噬菌体,即为Tb(Tbilisi)噬菌体[1,2]。自Tb噬菌体发现后,分离和发现新的布鲁氏菌噬菌体发展非常迅速。这些噬菌体的发现和丰富,大大促进了布鲁氏菌的鉴别和分型。但由于相关研究涉及生物安全性,以及生物技术手段的限制,针
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摘要 目的：研究布鲁氏菌噬菌体Tb(Tbilisi)的形态学和分子生物学特征。方法：采用透射电镜观察噬菌体颗粒形态，双层琼脂法观察噬斑形态，梯度密度离心纯化噬菌体颗粒，提取噬菌体基因组，采用多种限制性内切酶(S1，DNase I，RNase A，BamHI)对基因组进行酶切琼脂糖凝胶电泳，SDS-PAGE观察噬菌体颗粒全蛋白片段。结果：Tb噬菌体电镜下显示头部直径为57±2nm，短尾(32±3nm长)，分类学属于短尾噬菌体科。培养48小时后显示清晰噬斑，大小为2～3mm。核酸结构分析均表明Tb噬菌体基因组为线性dsDNA分子。基因组DNA经限制性内切酶BamHI酶切产生2条清晰条带，分子量在34.5kb左右。SDS-PAGE全蛋白电泳显示Tb噬菌体含有9条主要结构蛋白。结论：该研究证实了Tb噬菌体属于短尾病毒科噬菌体，对宿主菌存在裂解效应并产生2～3mm清晰透亮形态的噬斑，基因组为dsDNA分子，全蛋白包含9条主要的结构蛋白。该研究结果为布鲁氏菌噬菌体的分子水平的研究提供了新的研究基础。
关键词：布鲁氏菌噬菌体；形态学；分子特征
中图分类号：Q939.9
文献标识码：A
文章编号：1673-6273(2009)09-1609-03
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