猪链球菌2型ABC转运蛋白gene0910敲除突变体的构建及活性分析
 |
| 第1页 |
参见附件(3369KB，5页)。
骈亚亚 郭洁 郑玉玲 袁媛 姜永强 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室;华中农业大学食品科技学院;
【摘要】目的:构建猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)强毒株05ZYH3389K毒力岛上的ABC转运蛋白gene0910敲除突变体,并初步分析其活性,为进一步研究猪链球菌假想毒力因子在致病中的作用提供实验基础。方法:以猪链球菌2型05ZYH33基因组为模板,扩增gene0910两侧各约500bp左右的片段为上下游同源臂,以pSET1质粒为模板,扩增氯霉素抗性基因Cm为中间片段,采用重叠PCR方法搭建三个片段,并克隆到自杀载体pSET4S上,构建基因敲除的载体。电转化05ZYH33感受态细胞,经30℃双交换和40℃质粒丢失,最后点板法筛选出基因敲除突变体△0910。对突变株和野生株的生物学活性及小鼠的致病性进行了初步比较。结果:PCR分析和测序结果均显示gene0910完全被氯霉素抗性基因Cm所替代,基因敲除突变体构建成功。结论:突变株的生物学活性和对小鼠的致病性与野生株相比差异不显著。
【关键词】 猪链球菌型 K毒力岛 ABC转运蛋白 基因敲除
【基金】国家自然科学基金(30870091,30770117,30600023)
【分类号】S852.611
前言猪链球菌2型又称猪链球菌血清型2型(Streptococcussuis serotype2,SS2),是一种重要的人畜共患病原菌,1998年～2005年我国江苏和四川等地多次暴发猪链球菌病,不但造成大量猪死亡,而且导致数十人感染致死,严重影响着我国养猪业的发展和人民的生命安全。猪链球菌2型可导致人
------
前言
猪链球菌2型又称猪链球菌血清型2型(Streptococcus suis serotype 2，SS2)，是一种重要的人畜共患病原菌，1998年～2005年我国江苏和四川等地多次暴发猪链球菌病，不但造成大量猪死亡，而且导致数十人感染致死，严重影响着我国养猪业的发展和人民的生命安全。猪链球菌2型可导致人脑膜炎、心内膜炎、关节炎和败血症，死亡病例多表现为中毒性休克样综合症(TSLS)。目前已知的毒力因子有溶菌酶释放蛋白(MRP)、细胞外蛋白因子(EF)、溶血素(SLY)、荚膜多糖(CPs)、纤连蛋白，纤维蛋白原结合蛋白(FBPs)、3-磷酸甘油酸脱氢酶(GAPDH)、精氨酸氨基肽酶、血清浊度因子”等。但由于毒力因子的复杂性和多样性，猪链球菌2型的致病机理至今仍不十分清楚。分离和鉴定更多的SS2毒力因子已成为该领域的研究热点。
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3369KB，5页)。