CDH17/pcDNA3.1(-)真核表达载体的构建与鉴定
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奚海林 牛建华 袁明 木拉提 新疆石河子大学医学院第一附属医院普外三科;
【摘要】目的:构建肝肠钙黏连蛋白(CDH17)基因pcDNA3.1(-)真核表达质粒,为进一步研究胃癌发病的分子机制和生物学行为以及寻找新的抗转移措施奠定理论基础。方法:用Trizol Reagent抽提胃腺癌组织中总RNA,采用逆转录巢式PCR方法扩增CDH17目的片段,双酶切纯化PCR产物及pcDNA3.1(-),再将CDH17基因片断插入pcDNA3.1(-)线性质粒,即构建成CDH17/pcDNA3.1(-)真核细胞表达质粒,将质粒转染感受态细胞DH5a,筛选阳性克隆行双酶切鉴定及DNA测序鉴定。结果:DNA测序结果与预期目的片段序列一致。结论:CDH17/pcDNA3.1(-)真核细胞表达质粒构建成功。
【关键词】 肝肠钙黏连蛋白 质粒 消化道肿瘤
【分类号】R735.2
Cadherin-17(liver-intestine cadherin,CDH17,肝肠钙粘连蛋白)作为上皮性钙粘蛋白E-CD超家族中的一位特殊成员,在结构和功能上不同于其他经典钙粘连蛋白,是对经典的钙粘蛋白和桥粒钙粘蛋白功能的补充[1]。CDH17基因在胃黏膜中的异常表达,与胃黏膜肠上皮化生、异型增生、癌变
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Cadherin-17(liver-mtestme cadherin,CDH17,肝肠钙粘连蛋白)作为上皮性钙粘蛋白E-CD超家族中的一位特殊成员，在结构和功能上不同于其他经典钙粘连蛋白，是对经典的钙粘蛋白和桥粒钙粘蛋白功能的补充。CDH17基因在胃黏膜中的异常表达，与胃黏膜肠上皮化生、异型增生、癌变密切相关。利用重组DNA技术构建CDH17基因的真核表达重组质粒CDH17/pcDNA3.1(-)，为研究胃癌发病的分子机制和生物学行为以及寻找新的抗转移措施奠定理论基础。
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