HPLC-MS/MS法检测星形胶质细胞兴奋性氨基酸释放
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孙俊枝 孙晓鹏 杨钊 褚海辰 青岛大学医学院附属医院麻醉科;青岛市药品检验所;
【摘要】目的:建立一种快速测定星形胶质细胞上清中兴奋性氨基酸释放的高效液相-串联四级杆质谱方法。方法:使用高效液相-串联四极杆质谱的多反应监测(MRM)模式快速测定星形胶质细胞(AST)兴奋性氨基酸(EAAs)的释放量。结果:该方法检测细胞上清液中兴奋性氨基酸释放量能够在4分钟内完成,有很好的精密度(Glu1.0%,Asp1.6%),较好的稳定性(组内的变异系数Glu为1.34%,Asp为1.41%;组间变异系数Glu为2.32%,Asp为2.18%)和回收率(Glu97.1%;Asp95.8%)。结论:该方法定量检测兴奋性氨基酸快速、准确,可用于大批量样品的快速测定。
【关键词】 星形胶质细胞 兴奋性氨基酸 高效液相色谱 串联四极杆质谱
【基金】山东省自然科学基金[Y2006C11]
【分类号】R341
兴奋性氨基酸(EAAs)是脑内最重要的神经递质,参与神经系统的每一种功能,尤其是疼痛及调节作用[1-3],星形胶质细胞是兴奋性氨基酸重要的代谢场所,在激活的状态下可以释放EAAs[4-5],目前兴奋性氨基酸的检测主要采用氨基酸自动分析仪法[6]、高效液相色谱法[7,8],气相色谱法[9]和
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兴奋性氨基酸(EAAs)是脑内最重要的神经递质，参与神经系统的每一种功能，尤其是疼痛及调节作用，星形胶质细胞是兴奋性氨基酸重要的代谢场所，在激活的状态下可以释放EAAs，目前兴奋性氨基酸的检测主要采用氨基酸自动分析仪法、高效液相色谱法，气相色谱法和高效毛细管电泳法，这些方法偏重于定性检测，其灵敏度不高，选择性相对较差，操作较繁琐，本研究建立了一种快速测定星形胶质细胞上清中兴奋性氨基酸释放的高效液相～串联四级杆质谱方法，克服已有缺点，是一种选择性强、灵敏度高、准确、快速的检测方法。
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