兔骨髓间充质干细胞的体外分离培养和生物学特性观察
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张磊 张琦 钱济先 文艳华 裘秀春 马保安 范清宇 解放军一一八医院;第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所;
【摘要】目的:探讨兔骨髓间充质干细胞体外分离、培养和鉴定方法,观察其生物学特性。方法:采集兔股骨及胫骨骨髓组织,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离、培养和扩增兔骨髓间充质干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态,绘制原代、第1、3、8代细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标志物,成骨和成脂肪诱导培养鉴定,观察细胞生物学特性。结果:培养的BMSCs呈纺锤形、长梭形,旋涡状排列、放射性生长,增值活跃。各代细胞生长曲线呈S型,细胞增值活跃。细胞表面标志物CD44分子阳性,CD34和CD45分子阴性。经成骨和成脂肪诱导后细胞碱性磷酸酶染色和油红O染色阳性。结论:成功建立了兔BMSCs体外分离、培养的有效方法,扩增的BMSCs仍保留多向分化潜能,是理想的组织工程种子细胞。
【关键词】 骨髓间充质干细胞 细胞培养 细胞分化 组织工程
【分类号】Q813
前言间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)是一类定植于骨髓基质[1],以及其他器官,包括胚胎、脐带血、肝脏和脂肪组织等[2,3]中的多能干细胞,具有分化为多种成熟组织的能力。在一定的诱导条件下体外培养MSCs可呈现出骨、软骨、脂肪和肌腱等中胚层来源器官的细胞表型[4]
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前言
间充质干细胞(Mesenchymal stem cclls.MsCs)是一类定植于骨髓基质，以及其他器官，包括胚胎、脐带血、肝脏和脂肪组织等凹中的多能干细胞，具有分化为多种成熟组织的能力。在一定的诱导条件下体外培养MsCs可呈现出骨、软骨、脂肪和肌腱等中胚层来源器官的细胞表型。骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem ccl!s dedved from bone marrow，BMSCs)是来源于骨髓的MsCs，具有采集方便的优点，是理想的组织工程种子细胞。本实验总结出一系列兔BMsCs的采集、分离和培养方法，并对细胞的生长活力、表型特征和分化潜能进行鉴定，为应用兔BMsCs进行组织工程研究奠定实验基础。
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