肺微血管内皮细胞的原代培养
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时全星 孙新 李娟 郭海涛 殷玥 毕辉 胡玉珍 王跃民 裴建明 第四军医大学基础部生理学教研室;西京医院儿科;
【摘要】目的:建立简单高效获取大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)的培养方法。方法:(1)组织块贴壁法培养大鼠PMVECs;(2)光镜下观察细胞的形态;(3)扫描电镜和透射电镜分别观察细胞表面及内部的结构特征;(4)免疫荧光法鉴定PMVECs。结果:(1)获得的PMVECs长满后呈典型的铺路石或鹅卵石状;(2)扫描电镜下可见内皮细胞表面存在微绒毛等特殊结构;(3)透射电镜观察可见细胞浆内存在韦伯潘力氏小体(WebelPaladebody,WPB);(4)免疫组化结果显示细胞浆中有Ⅷ因子相关抗原存在。结论:改良的组织块法培养肺微血管内皮细胞是一种简单、快捷,有效的方法。
【关键词】 肺 微血管内皮细胞 大鼠
【基金】国家自然科学基金资助项目(NO:30900535,30971060,30700345,30770802)
【分类号】R329
前言肺微血管内皮细胞(PMVECs)呈单层覆盖于肺微血管内表面,构成血管内外物质交换的一道重要屏障,是循环血流剪切力和血液中危险因素的主要靶目标,因而最容易并且最早受到伤害[1-2]。大量研究显示,血管内皮是许多心血管疾病或危险因子作用的重要靶器官,它具有相当活跃的内分
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前言
肺微血管内皮细胞(PMVECs)呈单层覆盖子肺微血管内表面，构成血管内外物质交换的一道重要屏障，是循环血流剪切力和血液中危险因素的主要靶目标，因而最容易并且最早受到伤害。大量研究显示，血管内皮是许多心血管疾病或危险因子作用的重要靶器官，它具有相当活跃的内分泌和代谢功能，很多致病因素，比如高脂血症，低氧、应激等都是通过损伤内皮从而使内皮功能失调，而内皮功能失调是多种疾病的发病基础。本室一直从事低氧性肺动脉高压(hypoxia pulmonary artery hypertension，HPH)大鼠的防治及其机制的研究，低氧性肺动脉高压的两个主要发病过程是低氧性肺血管收缩反应(HPV)和肺血管结构重建(PVR)，而慢性低氧导致血管内皮功能失调是HPV和PVR的主要环节。内皮功能失调主要表现为内皮结构和功能的改变。所以通过体外培养微血管内皮细胞及多种模型的建立来研究生理和病理情况下微血管内皮细胞的内分泌和代谢功能等具有重要的意义。近年来也有很多文献报道肺微血管内皮细胞的分离和培养，但仍有很多细节有待改良。本实验结合文献报道的大鼠PMVECs的体外培养方法及内皮细胞原代培养方法进行了改进及探索，以期探寻一种更为简便和高效的大鼠PMVECs培养方法。
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