COX-2和Bax在非小细胞肺癌中的表达及意义(2)
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1.2 实验方法
1.2.1 HE染色 石蜡标本4 μm连续切片，60℃烤片2 h。二甲苯脱蜡，经梯度酒精至水，苏木素染色细胞核，清洗，盐酸酒精分化，返蓝，伊红染细胞浆，梯度酒精脱伊红，二甲苯透明，中性树胶封片。
1.2.2 免疫组织化学法 兔抗人COX-2免疫组化单克隆抗体、鼠抗人Bax免疫组化单克隆抗体、链霉卵白素过氧化酶(S-P)免疫组织化学试剂盒均购自于福州迈新生物技术开发有限公司。操作按S-P免疫组织化学试剂盒说明书进行, 操作步骤如下：石蜡切片常规脱蜡至水,内源性过氧化物酶阻断10 min,微波抗原修复,一抗孵育过夜(4℃),二抗孵育20 min(室温),链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶孵育30 min(室温),DAB显色5～10 min,苏木素复染后,脱水,透明,封片，光镜下观察。取阳性对照片同步操作作为阳性对照；用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定: 选择5个有代表性高倍视野,计算阳性细胞数，阳性细胞数≥31%为染色阳性,<30%为染色阴性，以已知的阳性组织切片作阳性对照,以PBS代替一抗作阴性对照。
1.2.3 统计学方法 计数资料用阳性率(%)表示,组间比较用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 COX-2的检测结果
2.1.1 COX-2在正常肺组织中及NSCLC中的表达 免疫组织化学结果 COX-2在57例NSCLC组织中表达率为59.6%(34/57),在正常组织表达率为0%(0/15),经χ2检验,肺癌组织COX-2蛋白表达阳性率高于癌旁正常组织(χ2=16.953,P<0.01)见表1 ......
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