FG-FK506药物缓释系统对大鼠坐骨神经损伤修复作用的实验研究(2)
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1.2 方法
1.2.1 实验动物及分组 取健康SD大鼠24只,体重180~200 g,雌雄不限,动物由辽宁医学院实验动物中心提供。随机分为4组,每组6只。(表1)
表1
实验动物分组
组别数量(只)处置
A组(空白对照组)6空白对照
B组(FG-FK506 组)6吻合口局部应用 FG-FK506药物缓释系统
C组(FK506组)6术后腹腔注射FK506,0.5 mg/(kg•d),连续14 d
D组(FG组)6吻合口局部应用FG
1.2.2 大鼠坐骨神经损伤模型制作及处置方法
首先依照纤维蛋白凝胶说明书配置主体液及催化剂2组,分别置入产品自带双推器中,一组中两只注射器分别吸入0.5 ml注射用FK506,另一组中两只注射器分别吸入0.5 ml生理盐水,分别连好连接针座及无尖针头。全程无菌操作,放在手术台上备用[9,10]。3%戊巴比妥(30 mg/kg)腹腔注射麻醉,俯卧位,严格无菌操作,分离出左侧坐骨神经,于腓总神经分枝近端1 cm处切断,直接吻合,每个吻合口用8/0无创尼龙线外膜加束膜缝合法缝合4针,彻底止血后A组、C组直接逐层缝合切口,B组大鼠吻合神经吻合口周围注入预先混合好的FG-FK506,每只应用0.5 ml。D组大鼠神经吻合口周围注入FG,每只0.5 ml,注入凝胶后,5~10 s形成半透明乳白色薄膜,3~5 min后,FG完全凝固在神经吻合口周围,逐层关闭切口。所有动物术后连续3 d腹腔注射青毒素160 wu/kg,分笼标记,统一喂养。C组大鼠每日腹腔注射FK506 0.5 mg/(kg•d),连续14 d。
1.2.3 指标观察与检测
1.2.3.1 一般观察 术后连续观察各组大鼠局部伤口的愈合情况、足跟溃疡形成愈合时间、步态、关节活动情况,12周观察再生神经的大体形态。
1.2.3.2 神经电生理检测 术后12周各组大鼠用3%戊巴比妥钠腹腔麻醉后,俯卧位暴露左侧坐骨神经,利用肌电诱发电位仪检测神经功能,将接收电极置于小腿外侧中段腓骨长短肌肌腹中,刺激电极置于神经吻合口近端进行刺激,分别记录复合肌肉动作电位(Compound Muscle Action Potentials, CMAP)波幅、及运动神经传导速度(Motor Nerve Conductive Velocity, MNCV) ......
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