人类白细胞抗原在自然流产中的表达
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【摘要】 目的 探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)蛋白在早孕绒毛和自然流产中的表达及意义。方法 应用免疫组化法检测30例早孕绒毛、20自然流产的表达情况。结果 ①HLA-G蛋白在自然流产患者的绒毛表达明显低于早孕绒毛, 两者比较, 差异有显著(P<0.005)。结论 HLA-G蛋白的表达可能是自然流产患者的原因之一。
作者单位:261000山东省潍坊市妇幼保健医院妇科
自然流产是妇产科的一种常见病,其发生率约占临床妊娠的1%~2%,且绝大多数发生于孕早期(孕前3 个月)。其病因一直不明,近几年来的研究结果表明, HLA-G与自然流产的发生发展密切相关,本文就此进行实验观察。
1 对象与方法
1.1 对象 2008年1月至2009年12月在我院妇科门诊就诊的自然流产患者,孕周6~12周20例,彩超提示胚胎停止发育(无心管搏动、不能见到胎芽等),均排除孕期感染及有害物质接触史。在门诊正常早孕流产的患者30例,孕周为6~12周,两组患者平均年龄21~39岁,年龄、孕周无差异。所有标本均经病理学诊断验证,所有病例手术前三个月内均未经激素治疗。
1.2 方法 HLA-G蛋白的检测采用过氧化酶标记的链霉卵白素染色方法(immunohistochemical method, SP)。主要步骤为:石蜡切片脱蜡至水,严格按照试剂盒操作步骤进行,DAB 显色,苏木素复染,脱水透明封片, 光镜下观察。以PBS 代替一抗作为空白对照组, 正常子宫内膜作为阴性对照组。检测结果的判定:以黄色和棕黄色为阳性信号。根据染色强度和显色细胞的比例进行综合评分。①按组织中有无显色及深浅评分:无显色者为0分,呈浅黄色或黄色者为1分,呈棕黄色者为2分,呈棕褐色者为3分;②阳性反应为胞浆或胞膜有棕黄色颗粒,以细胞着色比例分级为:<30%的细胞着色,计0分;30%~50%的细胞着色,计1分;50%~75%的细胞着色,计2分;>75%的细胞着色,计3分。每例标本的积分为:(染色强度+显色细胞比例)/2;按积分的高低分为:0分为阴性(-),0.5-1分为弱阳性(+),1.5~2分为中等阳性(++),2.5~3分为强阳性(+++)。
1.3 统计学处理 采用χ.2检验。
2 结果
表1
两组检测结果比较(例)
组别例数-++++++
早孕绒毛3027129
习惯流产绒毛206554
注:χ.2=4.835P<0.05两组比较结果差异有意义
3 讨论
3.1 自然流产是指妊娠早期(怀孕20周内)流产。其发生率占育龄妇女的1%～2%[1]。其病因一直不明现代生殖免疫学认为,其发生是母胎之间免疫状态失衡导致免疫排斥的结果[2],而人体对移植物的排斥反应,主要由组织相容性复合体基因调控,其中包括HLA。
近年来研究发现,人类白细胞抗原G(HLA-G)主要表达于母胎界面的绒毛外滋养层细胞,其表达与母胎介面的免疫逃逸有关[3]。由于在妊娠头3个月HLA2 g的表达下降,可使滋养细胞侵蚀分化过程受阻,滋养细胞不易侵入子宫蜕膜及重铸螺旋动脉,绒毛着床过浅,血管发育欠佳,不能有效供应胎盘营养,使胎盘生长发育受限,导致胎儿生长受限、自然流产。胎儿HLA一半基因来自父体,母- 胎之间99%的HLA不相同,正常妊娠夫妇不相容,可以遗传双亲有利方面。维持遗传的多样性防止致死性纯合子结合。本文研究自然流产患者的绒毛HLA-G蛋白的表达明显低于正常妊娠患者。
3.2 HLA-G与自然流产的发生密切相关,在妊娠早期,高水平的HLA-G能够抑制母体免疫系统对胎儿的攻击,HLA-G水平降低可能导致流产 ......
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