葶苈子微波炮制品药效学实验研究
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【摘要】 目的 观察葶苈子微波炮制品的镇咳、祛痰和利尿作用,并与传统炒制品进行比较。方法 采用小鼠“氨水引咳”法、“酚红排泌”法、大鼠“代谢笼”法观察葶苈子微波炮制品在镇咳、祛痰、利尿方面的作用。结果 葶苈子微波炮制品能明显延长小鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,促进酚红排泌,增加大鼠排尿量,与传统炒制品相比,无显著性差异。结论 葶苈子微波炮制品有明显的止咳、祛痰、利尿作用,可以代替传统制炒品应用。
【关键词】 葶苈子;微波;炮制;镇咳;祛痰;利尿
葶苈子为十字花科植物独行菜Lepidium apetalum Willd.(习称“北葶苈子”)或播娘蒿Descurainia Sophia (L.) Webb ex Prantl.(习称“南葶苈子”)的干燥成熟种子,味辛、苦,性大寒;具有泻肺平喘、利水消肿之功效,用于痰涎雍肺,喘咳痰多,胸腹水肿,小便不利,肺源性心脏病等[1]。从汉代起就有炮制后入药的记载,现代临床中主要以炒品入药,由于缺乏客观的工艺参数,其炒制工艺目前仍停留在传统的经验控制水平,不利于饮片质量和临床疗效的提高。本文作者采用微波技术对葶苈子进行加热炮制,通过均匀设计优选了葶苈子的最佳微波炮制工艺,为进一步验证微波炮制工艺的合理、可行性,从镇咳、祛痰、利尿三个方面对葶苈子微波炮制品的主要药效学进行观察,并与传统炒制品进行了比较。
1 实验材料
1.1 仪器 WD700(MG-4987T)微波炉(LG电子天津电器有限公司), UV-2401PC紫外可见分光光度计(日本岛津)。供试样品:葶苈子样品,经山东中医药大学石俊英教授鉴定为十字花科植物播娘蒿Descurainia sophia(L.) Webb ex Prantl.的干燥成熟种子(南葶苈子),产地山东威海。传统炒制品,取净选后的葶苈子200 g,按照2005年版《中国药典》一部,置铁锅内,文火炒至微鼓起,表面色泽稍加深,有香气逸出时,取出,放凉。微波炮制品,取净选后的葶苈子200 g,置微波炉内,微波小火力,加热7 min,取出,放凉。
1.2 实验动物 昆明种小鼠,18～22 g,雌雄兼有;Wistar大鼠,150～200 g,雄性;均由山东大学实验动物中心提供,质量合格许可证号:SCXK(鲁)20030004。实验条件:室温22～24℃,相对空气湿度50～60%,排气扇通风,雌雄分笼喂养,保持整洁,每2～3天打扫一次鼠舍,光/暗时间为12/12 h。
1.3 统计软件 SPSS 13.0统计软件。
2 实验方法与结果
2.1 镇咳实验 昆明种小鼠,18～22 g,雌雄各半,浓氨水恒压喷雾刺激10s后立即取出,记录小鼠从接受喷雾开始到出现咳嗽的潜伏期,以及2 min内的咳嗽次数。喷雾后2 min不咳嗽者舍弃。合格小鼠随机分组,各组按20 ml/kg体重灌胃给药,空白对照组灌胃蒸馏水,大、中、小剂量传统炒葶苈子、微波炮葶苈子组分别灌胃相应不同浓度的水煎液,连续7d,末次给药后1 h,分别接受氨水喷雾刺激10 s后立即取出,记录小鼠从接受喷雾开始到出现咳嗽的潜伏期及2 min内的咳嗽次数[2,3]。用SPSS 13.0统计软件作方差分析,比较组间均数,结果见表1。
表1
实验结果显示:不同方法炮制的葶苈子水煎液均可使小鼠咳嗽潜伏期延长、2 min内咳嗽次数减少,与空白对照组比较,有极显著性差异(P<0.01);相同剂量不同方法炮制的葶苈子之间无显著性差异(P>0.05);同一品种,不同剂量之间也无显著性差异(P>0.05)。
2.2 祛痰实验 昆明种小鼠,18～22 g,雌雄各半,随机分组,各组按20 ml/kg体重灌胃给药,空白对照组灌胃蒸馏水,大、中、小剂量传统炒葶苈子、微波炮葶苈子组分别灌胃相应不同浓度的水煎液,连续7d,末次给药后0.5 h,将已禁食12 h的小鼠腹腔注射0.5 g/dl的酚红溶液0.5 ml,注射后0.5 h脱颈椎处死小鼠,分离气管,取5 g/dlNaHCO3溶液0.5 ml来回灌洗气管3次,合并3次灌洗液,离心,取上清液于546 nm波长处测定吸光度,用酚红作一标准曲线,根据曲线计算酚红含量(ug/ml)[2,3]。用SPSS 13.0统计软件作方差分析,比较组间均数,结果见表2。
表2
实验结果显示:不同方法炮制的葶苈子水煎液均可使小鼠气管酚红排泌量增加,与空白对照组比较,有极显著性差异(P<0.01);相同剂量不同方法炮制的葶苈子之间无显著性差异(P>0.05);同一品种,不同剂量之间也无显著性差异(P>0.05)。
2.3 利尿实验
Wistar大鼠,150～200 g,雄性,灌胃生理盐水2.5 ml/100 g后,收集24 h内尿量,以排尿量达灌胃量的40%以上者选入实验,取预选合格大鼠随机分组,于禁食(不禁水)24 h后灌胃给予5 ml/100 g含被试药物的生理盐水负荷,用手压迫大鼠下腹部使其排尽余尿,空白对照组给予相应的生理盐水,放入代谢笼(每笼1只大鼠),连续收集尿液5 h,计算5 h总的排尿量[2,3]。用SPSS 13.0 for Windows统计软件作方差分析,比较组间均数,结果见表3。
表3
实验结果显示:不同方法炮制的葶苈子水煎液均可使大鼠5 h总排尿量增加;其中传统方法炒制小剂量组与空白对照组比较,有显著性差异(P<0.05);其余各组与空白对照组比较,有极显著性差异(P<0.01);相同剂量不同方法炮制的葶苈子之间无显著性差异(P>0.05);同一品种,不同剂量之间也无显著性差异(P>0.05)。
3 小结与讨论
3.1 微波是频率介于300 MHz和300 GHz之间的电磁波。微波法炮制中药主要是基于微波的热特性,而微波加热的原理有两个方面。一是通过“介电损耗”(或称为“介电加热”),具有永久偶极的分子在2450 MHZ的电磁场中所能产生的共振频率高达4.9×109次/s,使分子超高速旋转,平均动能迅速增加,从而导致温度升高;二是通过离子传导,离子化的物质在超高频电磁场中以超高速运动,因摩擦而产生热效应[4] ......
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