2,3-吲哚醌在大鼠体内的药代动力学研究
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2.1.2 口服给药溶液的配制 称取适量受试物，溶于1.25%西黄耆胶水溶液中，得到浓度为5 mg/ml的混悬液，用于口服给药。
2.2 动物分组与给药
6只SD大鼠随机分为2组，每组3只。第一组：通过尾静脉注射给予动物受试物溶液，剂量为2 mg/kg体重；第二组： 通过口服灌胃给予动物受试物溶液，剂量为5 mg/kg体重。
2.3 血液样本采集与预处理
经眼眶静脉(异氟烷麻醉后)或其他合适的静脉采大约0.25 ml血液，置于含K2EDTA的一次性真空采血管内。采集时间点为：给予受试物前(0 hr)和给予受试物后5、15、30 min、1、2、4、6、8 h和24 h。血液样本采集后置于冰上，并立即取出50 μl全血加入已混有内标(50 ng/ml 奎硫平)的250 ml甲醇溶液中涡旋1 min后，离心分离上清液(离心条件：15000转/min钟，5 min，2~8℃)，收集的100 μl上清液分析前存放于-80℃。
2.4 标准曲线和质控样品的配制
取适量2,3-吲哚醌储备液，用甲醇：水混合溶液(1∶1，v/v)逐级稀释，配制成浓度为100，40，20，4，2和1 μg/ml的标准溶液，取标准溶液各5 μl平行加入到195 μl 大鼠空白全血或空白尿液中，制得浓度为 2500，1000，500，100，50和25 ng/ml的标准曲线样品。
取适量2,3-吲哚醌储备液，用甲醇：水混合溶液(1∶1，v/v)逐级稀释，配制成浓度为100，80，和8 μg/ml的质控溶液，取质控溶液各5 μl平行加入到195 μl大鼠空白全血中，制得浓度为2000，200和40 ng/ml的质控样品。
2.5 样本分析
采用液相色谱串联质谱联用对处理好的样品进行测定。测定条件如下：色谱条件：流动相：甲醇-5 mM甲酸/氨水(65:35, v/v)；流速：0.3 ml/min；柱温：35℃；进样量：5 μl。质谱条件:采用电喷雾离子化源(ESI)，正离子模式，喷雾电压4500 V，雾化气为氮气，雾化压力为50 psi；去溶剂气为氮气，温度350℃，流速为9 L/min；采用多反应监测(MRM)模式对药物离子浓度进行测定，淫羊藿苷及内标的最优MRM参数见表1。
3 实验结果
3.1 分析方法
血液样品分析方法(LC/MS/MS)的开发和样品分析将在美迪西普亚医药科技(上海)有限公司分析部门完成。该分析方法符合国内外生物样品分析的有关规定[4-6]。
3.2 药代动力学结果
SD大鼠静脉注射及口服给予2,3-吲哚醌后的血药浓度数据见表2和图1。
3.3 药代动力学参数
通过不同时间点的血药浓度数据，运用WinNonlin 5.2计算药代动力学参数，结果见表3。
图1
1雄性SD大鼠静脉及口服给予2.3-吲哚醌后的浓度-时间曲线(n=3)
3 讨论
2,3-吲哚醌为内源性物质，本文从空白血液中可检测到一定量的2,3-吲哚醌，本方法所测得的浓度数据为内源性2,3-吲哚醌及给药后暴露于血液中的2,3-吲哚醌之和。
从静脉药时曲线可见，静脉的给予后血药浓度与内源性比较接近，可能是给药后2,3-吲哚醌迅速分布至组织所致，本药的表观分布容积较大也与之对应。且在采血末端时间点有反跳，可能是内源性2,3-吲哚醌的干扰。
初步研究表明，2,3-吲哚醌口服的生物利用度较高，为57.75%，提示口服给药可作为该药的首选给药方式，这对于该药物的临床应用具有重要价值，并为该内源性药物的研发提供了重要的药动学依据。
参 考 文 献
[1] Glover V, HalketJM, Watkins PJ, et al. Isatin: identity with the purified monoamine oxidase inhibitor tribulin ......
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