高危型HPV检测及TCT方法在宫颈癌早期诊断中的应用(1)
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【摘要】 目的 研究HRHPV感染与宫颈癌发生发展的关系；以组织病理学诊断为金标准， 评价TCT细胞学检查和HRHPV检测在诊断CINⅡ和Ⅲ中的应用价值，为宫颈癌筛查及早期诊断提供新的检测手段。 方法 选取2008年1月至2009年6月在宁夏医科大学总医院就诊的宫颈病变患者159例，进行细胞学检查(TCT方法)、HRHPV感染检测(HCⅡ方法)以及组织病理学检测；依据病理学诊断，将患者分为正常、炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和鳞癌六组；统计学分析运用SPSS 11.5软件，多个样本率的比较采用检验。 结果 ①HRHPV感染率在各组中差异有统计学意义(P<0.05)；但在CINⅠ、Ⅱ、 Ⅲ三组中差异无统计学意义(P>0.05)。②TCT细胞学筛查宫颈病变的检出率低于病理学。③HRHPV DNA检测的灵敏度高于TCT细胞学，而后者的特异度高于前者。 结论 ① HRHPV的感染率随着宫颈病变程度的加重而升高，与CIN和宫颈癌的发生发存在高度一致性。② HRHPV感染与TCT细胞学联检，可增加高级别CIN的检出率，有效预防宫颈癌的发生，在临床诊断中有重要的应用价值。
【关键词】
宫颈癌；高危型人乳头瘤病毒；新柏氏液基薄层细胞学检测系统
项目基金：卫生部科研课题基金资助(项目编号:WKJ20073001)
作者单位：750004银川,宁夏医科大学总医院医学实验中心
通讯作者:魏军
浸润性子宫颈癌(invasional cervical cancer，ICC)是严重威胁妇女健康的最常见的恶性肿瘤之一，发病率和病死率都较高。我国每年有新发病例近10万[1]并呈现年轻化趋势，病死人数3万～5万。癌前病变筛查及早期诊断是降低ICC发病率和病死率的关键，也是治疗宫颈癌及预后监测的有效手段。近年来研究表明，高危型人乳头瘤病毒(highrisk human papillomaviruses, HRHPV)持续性感染是宫颈癌前病变和宫颈癌发生发展的主要因素[2]。巴氏涂片细胞学检查作为宫颈癌筛查的方法已运用50多年，明显降低了宫颈癌的病死率，但由于受取材、涂片、阅片等因素影响假阴性率较高，有文献报道为20%～40%[3]。本研究通过采集宫颈病变患者子宫颈上皮脱落细胞，采用第二代杂交捕获实验(hybrid capture Ⅱ, HCⅡ)检测HRHPV感染，并使用新柏氏液基薄层细胞学检测系统(Thinprep Cytologic Test, TCT)进行细胞学检查；旨在探讨宫颈病变各阶段中HRHPV的感染情况；并运用统计学分析，对TCT细胞学检查和HCⅡ检测HRHPV感染两种方法的敏感度和特异度进行评价，为临床提供更为准确可靠的宫颈癌筛查依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2008年1月至2009年6月在宁夏医科大学附属医院就诊的宫颈病变患者159例，年龄26～75岁；除外先天性遗传病、妊娠、生殖道急性炎症和严重内科疾病患者。病理学分组：采用2007年WHO宫颈癌病理分类标准，依据病理诊断结果分为正常、宫颈炎、子宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ、鳞癌(squamous cell carcinoma, SCC)六组。细胞学检查采用2001年子宫颈细胞学Bethesda报告系统(The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology, TBS)诊断标准，将TCT细胞学检查结果分为六类：正常范围(within normal limit, WNL)、意义不明的非典型鳞状上皮增生(atypical squamous cell of undetermined significance，ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(lowgrade squamous intraepithelial lesions, LSIL)、高度鳞状上皮内病变(highgrade squamous intraepithelial lesions, HSIL)和鳞癌。
1.2 研究方法
1.2.1 HCII方法检测HRHPV DNA 使用美国Digene公司生产的DML 2000杂交捕获系统，可以一次性精确地检出13种HRHPV病毒亚型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)。用专门HC宫颈采样器采集标本，常温下可保存两周；如在1周后进行检测，标本于20℃可保存3个月。通过裂解、杂交、捕获、反应、冲洗和信号收集等步骤，在DML2000系统上进行判读，分析演绎结果。参考范围为0～1.00 pg/ml，检测结果大于1.00 pg/ml时，判定HRHPV DNA检测阳性，表示存在HRHPV感染。
1.2.2 TCT细胞学检查 使用意大利HOSPITEX公司生产的Cyto Fast 赛涂液基薄层制片系统进行细胞学检查。使用TCT检查专用采样器采集子宫颈细胞标本后置入保存液中进行漂洗，获得全部细胞标本，常温下标本可保存2周。经过标本预处理、液基薄层细胞制片、染色和透明封固后，采用2001TBS描述性分类诊断系统进行阅片。
1.2.3 统计学方法 应用SPSS 11.5软件进行数据分析，多个样本率的比较采用检验，以P<0.05具有统计学意义。
2 结果
2.1 HRHPV在宫颈病变各阶段中的感染情况 HRHPV的感染率随着宫颈病变程度的加重而升高，各组HRHPV感染率与正常组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；HRHPV感染率在CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ各阶段中逐步增高，各组感染率经检验，差异无统计学意义(P>0 ......
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