应用锁核酸探针技术检测肿瘤样本中K-ras基因突变(1)
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[摘要] 目的 应用锁核酸探针技术检测肿瘤样本中K-ras基因突变,探讨其诊断价值。方法 结合锁核酸TaqMan探针与实时荧光PCR 技术建立K-ras基因突变快速检测法,与传统聚合酶链反应-单链构象多态性分析法( PCR-SSCP)及测序结果进行比较,评价新方法的诊断价值。结果 锁核酸探针PCR 法可对肿瘤样本中K-ras基因突变进行有效检测,操作简便;可在104倍的野生型K-ras基因背景下检测出突变,灵敏度为0.1%,可检测突变基因最低限为10拷贝/ mL,相对应传统方法,本方法可同时进行较大规模的样品检测,更快捷和灵敏。结论 锁核酸探针实时荧光PCR法较PCR-SSCP法有明显优势,适用于大规模临床样本的K- ras基因突变检测,可作为肿瘤筛查和预后判断有效手段。
[关键词] 锁核酸; K-ras; 荧光PCR; PCR-SSCP
[中图分类号] R730.4 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)11-86-03
Assay for K-ras Mutation in Tumor Samples by Locked Nucleic Acid Probe Technique
ZHANG Wei1 ZHONG Xiang2 XIA Xianke1
1.Department of Clinical Laboratory,Xiangtan County People's Hospital,Xiangtan 411228,China;2.Laboratory of Molecular Biology of Hunan Province Clinical Testing Center,Changsha 410007,China
[Abstract] ObjectiveTo establish a locked nucleic acid(LNA)probe mediated PCR assay for discriminating K-ras mutation,and to evaluate its diagnostic value ......
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