晚期糖基化终末产物受体在2型糖尿病大鼠种植体骨结合中的表达(2)
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1.2.3 样品采集 8周后禁食12h后,测血糖、体重,下腔静脉采血处死大鼠。取下种植体,剔除包括骨膜在内的所有软组织,每组取大鼠的右侧胫骨行骨密度测量和X线拍片,10%中性缓冲福尔马林液固定,EDTA脱钙,乙醇逐级脱水,石蜡包埋,取种植体周围5mm的骨组织进行5μm切片。用Hitachi2850型荧光分光光度计测定血清中AGE的含量。
1.2.4 骨密度测定 剔胫骨表面的软组织,以Lunar Prodigy双能X线骨密度仪测定右侧胫骨种植体的骨矿物密度[4]。
1.2.5 骨组织RAGE免疫组织化学染色及图像分析 按RAGE免疫组化染色试剂盒说明书操作,常规脱水、透明、中性树脂封片。在显微镜下对免疫组化结果进行观察。用Axioskop2 plus图像分析系统对RAGE阳性细胞率和阳性细胞平均光密度值作定量分析。
1.3 统计学处理
统计软件SPSS13.0行数据分析,结果以(χ±s)表示。采用方差分析,组间比较用LSD法。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 种植体愈合情况
20只种植大鼠均健康存活,创口愈合良好。种植体均未出现松动、两例DM种植组大鼠种植区皮下组织出现脓液。其余未见红肿破溃。
2.2 胰岛素对DM大鼠种植体BMD、血清中AGE、血糖和体重的影响
DM组和正常对照组及DM种植组和正常种植组骨BMD、血清中AGE、血糖及体重变化的比较均有统计学意义(P<0.05)。见表1。
2.3 X线片观察的结果
DM种植组种植体周围胫骨骨皮质较正常种植组薄,部分出现吸收、骨髓腔变宽、松质骨骨纹理稀疏变细(封三图1)。正常种植组种植体周围胫骨皮质骨密度较均匀,骨髓腔较DM组窄,松质骨骨纹理致密而粗细均匀(封三图2)。DM种植组种植体周围骨组织表现为较低密度的影像。
2.4 免疫组化检测及图像分析结果
(1)四组大鼠胫骨周围骨组织均检测到RAGE的阳性表达 ......
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