山西地区汉族人Graves病与PARP—1、STAT4基因多态的关联研究(2)
1.2 实验方法
标本采集：所有研究对象均采集空腹静脉血2 mL，用EDTA抗凝，保存于-80 ℃。
外周静脉血DNA的提取用全血DNA提取试剂盒提取DNA，提取好的DNA存放于-20 ℃保存。
PCR扩增目的基因 PARP-1G1672A基因上游引物5-GCGAGACCCTGTCCCTAA-3，下游引物5-TCCCCCTTTTATTTTTGAGACTG-3。STAT-4rs757486基因上游引物：5-AGTATGAAAAGTTGGTGAC-3，下游引物：5-AATCCCCTGAAATTCCACTG- 3，反应体系50 μL，包括：上下游引物各1 uL(20 μM)，PrsmixTaqPCR25 μL，DNA模板(浓度为100 ng/μL)5 μL，ddH2O 18 μL，扩增产物于2%琼脂糖电泳检测。
PCR产物进行基因型分析：PARP-1基因的PCR扩增产物于37 ℃下在10 U的sh1236I孵育过夜 ......
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标本采集：所有研究对象均采集空腹静脉血2 mL，用EDTA抗凝，保存于-80 ℃。
外周静脉血DNA的提取用全血DNA提取试剂盒提取DNA，提取好的DNA存放于-20 ℃保存。
PCR扩增目的基因 PARP-1G1672A基因上游引物5-GCGAGACCCTGTCCCTAA-3，下游引物5-TCCCCCTTTTATTTTTGAGACTG-3。STAT-4rs757486基因上游引物：5-AGTATGAAAAGTTGGTGAC-3，下游引物：5-AATCCCCTGAAATTCCACTG- 3，反应体系50 μL，包括：上下游引物各1 uL(20 μM)，PrsmixTaqPCR25 μL，DNA模板(浓度为100 ng/μL)5 μL，ddH2O 18 μL，扩增产物于2%琼脂糖电泳检测。
PCR产物进行基因型分析：PARP-1基因的PCR扩增产物于37 ℃下在10 U的sh1236I孵育过夜 ......
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