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编号:13268473
Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义(2)
http://www.100md.com 2018年11月5日 《中外医疗》 2018年第31期
     1.2 方法

    流式细胞术检测方法:抽取患者清晨空腹静脉血3 mL,将其置入肝素抗凝真空采血管中,取300 μL全血,加入50 ng/mL十四烷酸PMA、0.7 μg/mL莫能霉素(型号BJ-0015-2016)、1 μg/mL离子霉素(美国生产、I-6800-5 mga),进行培养箱孵育5 h,24 h内检测外周血Th17细胞频率。

    酶联免疫吸咐法检测方法:血液离心处离后,取离心血浆,将其保存于零下80℃的冰箱内,通过ELISA检测IL-17水平。

    荧光定量法检测IL-17mRNA表达情况:取健康研究对象及乙型肝炎病毒患者的肝组织,将其放置于液痰中转移,并保存于-80℃的冰箱内备用,应用逆转录试剂合成cD-NA,待其迅速冰浴后。实施荧光定量PCR,扩增IL-17mRNA[2-3]。

    取新鲜肝组织后,将其固定于甲醛溶液中,24 h内将其制作成蜡块,对蜡块连续切片后,进行常规HE染色,在光学显微镜下观察,α-平滑肌肌动蛋白表达情况采用免疫组织化学染色法检测。

    1.3 分析指标

    分析3组研究对象血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率、α-平滑肌肌动蛋白水平、IL-17mRNA表达水平 ......
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