地中海贫血实验诊断的研究进展(1)
【摘要】地中海贫血(thalassaemias)是人类常见的特异性隐性遗传病。该病为单基因溶血性贫血症，在我国常见于南方人群，具有发病率高、重症患者胎儿死亡率高等特点，目前尚无彻底根治的方案。筛选恰当的地中海贫血实验诊断方法对该病的预防具有重要意义。本文综述了地中海贫血的实验室诊断方法，综合阐述了将筛查法和基因诊断法有机结合后统一应用，可以为地中海贫血的实验室诊断方面做出相应的贡献。随着现代社会科学技术的日益更新，地中海贫血的多种实验室诊断检测方法层出不穷。
【关键词】地中海贫血；实验室诊断；研究进展
Laboratory diagnosis of thalassemia Progress HUANG Lian-fen.The Second Peoples Hospital of Beihai City，Beihai 536000，China
【Abstract】Mediterranean anemia(Thalassaemias)the specificity of the human common recessive genetic disease.Single gene disease hemolytic anemia, common in southern populations in China,with a high incidence of severe fetal mortality in patients with advanced features,the program is currently no complete cure. Appropriate screening method for laboratory diagnosis of thalassemia prevention of the disease is important.This paper reviews the laboratory diagnosis of thalassemia,described the comprehensive screening method and combination of genetic diagnosis after the reunification of the application for the laboratory diagnosis of thalassemia and make the appropriate contributions.With the growing science and technology of modern society updates,thalassemia endless variety of laboratory diagnostic tests.
, 百拇医药
【Key words】Thalassemia；Laboratory diagnosis；Research
地中海贫血(thalassaemias)在人类遗传病中较为常见，它指的是因珠蛋白合成肽链时受阻而引发的特异性隐性遗传病[1]。该病为单基因溶血性贫血症，但其并不引起血红蛋白构造的变异，其具有多种亚型，以α、β两种亚型最为多见。α-地中海贫血与α-珠蛋白肽链合成被抑制密切相关。临床症状轻者仅表现出细微的血液学变化，重者则可能导致胎死腹中或早产后死亡。β-地中海贫血是因β-珠蛋白合成时基因发生突变，最终导致球蛋白合成减少而发病[2]。地中海贫血在东南亚、地中海等地区多见[3]，在我国则常见于南方人群。地中海贫血发病率高、重症患者胎儿死亡率高，但目前仍无彻底根治的方案。筛选恰当的地中海贫血实验诊断方法对该病的预防具有重要意义。现阶段用于地中海贫血症的实验室诊断技术主要存在筛查法和基因诊断法两大类，本文将此两类诊断方法综述如下。
1地中海贫血的筛查方法
, 百拇医药
随着医疗技术和医学水平的快速发展，地中海贫血的治疗已经有了较大的进步，但重症地中海贫血的治愈仍存在极高的难度。筛查法是地中海贫血实验诊断的常用方法，加强孕妇产前筛查和诊断对于重症地中海贫血的预防和根治具有重要指导意义[4]。系统的筛查法可以有效预防地中海贫血症的发生[5]，具有操作简便、手术经济负担小等优点[6]，常见的筛查手段主要包括：血液学常规检查和血红蛋白检查分析两大类，具体检查项目为。
1.1血细胞计数血细胞计数仪的使用是地中海贫血筛查法的必经步骤。血细胞计数仪可测定红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)和血小板基本参数。红细胞体积小和色素含量低是地中海贫血的主要临床症状之一[7]，所以红细胞的平均体积(MCV)和红细胞内血红蛋白的平均含量(MCH)对地中海贫血的筛查具有重要意义。目前MCV小于79 fl、MCH低于27 pg常被作为地中海贫血诊断的可疑筛查标准，在此情况下血红素、血细胞压积、红细胞数和白细胞数均会有一定程度的变化[8]。
, 百拇医药 1.2红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验是用于检测不同渗透压浓度的低渗盐水溶液中红细胞的抵抗力[9]。红细胞渗透脆性试验记录红细胞从开始溶血到全部溶血后的界限，这个界限是由红细胞的表面积与体积的比值而决定的。在低渗盐的水溶液中，渗透脆性低的红细胞易发生膨胀破裂现象，所以通过测定渗透脆性可以明显表征红细胞的形态异常情况。地中海贫血症的患者常存在不同程度的红细胞变形，渗透脆性减弱。已有学者利用患者红细胞渗透脆性实验结果来判断地中海贫血症。
1.3血红蛋白分析对地中海贫血患者血液中的各种血红蛋白进行定性和定量分析是一种快速可靠的确诊地中海贫血的方法。血红蛋白分析的方法有：(1)血红蛋白电泳法：该法的理论依据为各种血红蛋白的等点电均低于7，在pH 8.5的缓冲盐溶液中带负电荷。若有电场存在时，各种血红蛋白会在电场作用下向阳极移动。因各种血红蛋白的等电点各不相同，其向阳极移动的速度也不一样。所以通过血红蛋白电泳法可对各种血红蛋白行定性分析。血红蛋白电泳法使用醋酸纤维薄膜作为支持物时，还能定量分析经电泳分离的血红蛋白[10]。(2)毛细管电泳法：该法中各种血红蛋白将毛细管作为分离管道，在电场作用下因其定向移动速度的差别而实现分离。该法具有简便快速、重现性高、灵敏度强、分辨率好和消耗样品或试剂量少等优点，已逐步被临床采用[11]。(3)Hb琼脂糖电泳定量法：该法的检测依据为碱变性检测，即碱性条件下不同Hb分子会在电场作用下分离，经染色等操作后即可对Hb琼脂糖进行定量。地中海贫血症患者检测绝对值会较正常患者升高。(4)检测不稳定型的血红蛋白：包含异丙醇、包涵体和热变性试验。不稳定型血红蛋白含量的检测对地中海贫血的实验室诊断具有重要作用，地中海贫血症患者检测结果会偏高。(5)免疫细胞直接化学检测法：采用荧光标记等方法特异性检验抗体，行产前微创伤筛查。(6)其他：如高效液相色谱法等均能用于血红蛋白的定量分析。
1.4红细胞形态学检查在已制备好的新鲜染色血涂片上行瑞氏染色，以镜检法观察红细胞体积和形态的变化。红细胞形态的变化可作为地中海贫血的初步判断依据，大小形态延长或大小不一的红细胞则可能考虑为地中海贫血患者。
1.5辅助检查测定血清中铁含量，排除缺铁性贫血患者；辅助X线检测胎儿骨骼形态、骨髓腔的变化等。, 百拇医药(黄莲芬)
【关键词】地中海贫血；实验室诊断；研究进展
Laboratory diagnosis of thalassemia Progress HUANG Lian-fen.The Second Peoples Hospital of Beihai City，Beihai 536000，China
【Abstract】Mediterranean anemia(Thalassaemias)the specificity of the human common recessive genetic disease.Single gene disease hemolytic anemia, common in southern populations in China,with a high incidence of severe fetal mortality in patients with advanced features,the program is currently no complete cure. Appropriate screening method for laboratory diagnosis of thalassemia prevention of the disease is important.This paper reviews the laboratory diagnosis of thalassemia,described the comprehensive screening method and combination of genetic diagnosis after the reunification of the application for the laboratory diagnosis of thalassemia and make the appropriate contributions.With the growing science and technology of modern society updates,thalassemia endless variety of laboratory diagnostic tests.
, 百拇医药
【Key words】Thalassemia；Laboratory diagnosis；Research
地中海贫血(thalassaemias)在人类遗传病中较为常见，它指的是因珠蛋白合成肽链时受阻而引发的特异性隐性遗传病[1]。该病为单基因溶血性贫血症，但其并不引起血红蛋白构造的变异，其具有多种亚型，以α、β两种亚型最为多见。α-地中海贫血与α-珠蛋白肽链合成被抑制密切相关。临床症状轻者仅表现出细微的血液学变化，重者则可能导致胎死腹中或早产后死亡。β-地中海贫血是因β-珠蛋白合成时基因发生突变，最终导致球蛋白合成减少而发病[2]。地中海贫血在东南亚、地中海等地区多见[3]，在我国则常见于南方人群。地中海贫血发病率高、重症患者胎儿死亡率高，但目前仍无彻底根治的方案。筛选恰当的地中海贫血实验诊断方法对该病的预防具有重要意义。现阶段用于地中海贫血症的实验室诊断技术主要存在筛查法和基因诊断法两大类，本文将此两类诊断方法综述如下。
1地中海贫血的筛查方法
, 百拇医药
随着医疗技术和医学水平的快速发展，地中海贫血的治疗已经有了较大的进步，但重症地中海贫血的治愈仍存在极高的难度。筛查法是地中海贫血实验诊断的常用方法，加强孕妇产前筛查和诊断对于重症地中海贫血的预防和根治具有重要指导意义[4]。系统的筛查法可以有效预防地中海贫血症的发生[5]，具有操作简便、手术经济负担小等优点[6]，常见的筛查手段主要包括：血液学常规检查和血红蛋白检查分析两大类，具体检查项目为。
1.1血细胞计数血细胞计数仪的使用是地中海贫血筛查法的必经步骤。血细胞计数仪可测定红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)和血小板基本参数。红细胞体积小和色素含量低是地中海贫血的主要临床症状之一[7]，所以红细胞的平均体积(MCV)和红细胞内血红蛋白的平均含量(MCH)对地中海贫血的筛查具有重要意义。目前MCV小于79 fl、MCH低于27 pg常被作为地中海贫血诊断的可疑筛查标准，在此情况下血红素、血细胞压积、红细胞数和白细胞数均会有一定程度的变化[8]。
, 百拇医药 1.2红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验是用于检测不同渗透压浓度的低渗盐水溶液中红细胞的抵抗力[9]。红细胞渗透脆性试验记录红细胞从开始溶血到全部溶血后的界限，这个界限是由红细胞的表面积与体积的比值而决定的。在低渗盐的水溶液中，渗透脆性低的红细胞易发生膨胀破裂现象，所以通过测定渗透脆性可以明显表征红细胞的形态异常情况。地中海贫血症的患者常存在不同程度的红细胞变形，渗透脆性减弱。已有学者利用患者红细胞渗透脆性实验结果来判断地中海贫血症。
1.3血红蛋白分析对地中海贫血患者血液中的各种血红蛋白进行定性和定量分析是一种快速可靠的确诊地中海贫血的方法。血红蛋白分析的方法有：(1)血红蛋白电泳法：该法的理论依据为各种血红蛋白的等点电均低于7，在pH 8.5的缓冲盐溶液中带负电荷。若有电场存在时，各种血红蛋白会在电场作用下向阳极移动。因各种血红蛋白的等电点各不相同，其向阳极移动的速度也不一样。所以通过血红蛋白电泳法可对各种血红蛋白行定性分析。血红蛋白电泳法使用醋酸纤维薄膜作为支持物时，还能定量分析经电泳分离的血红蛋白[10]。(2)毛细管电泳法：该法中各种血红蛋白将毛细管作为分离管道，在电场作用下因其定向移动速度的差别而实现分离。该法具有简便快速、重现性高、灵敏度强、分辨率好和消耗样品或试剂量少等优点，已逐步被临床采用[11]。(3)Hb琼脂糖电泳定量法：该法的检测依据为碱变性检测，即碱性条件下不同Hb分子会在电场作用下分离，经染色等操作后即可对Hb琼脂糖进行定量。地中海贫血症患者检测绝对值会较正常患者升高。(4)检测不稳定型的血红蛋白：包含异丙醇、包涵体和热变性试验。不稳定型血红蛋白含量的检测对地中海贫血的实验室诊断具有重要作用，地中海贫血症患者检测结果会偏高。(5)免疫细胞直接化学检测法：采用荧光标记等方法特异性检验抗体，行产前微创伤筛查。(6)其他：如高效液相色谱法等均能用于血红蛋白的定量分析。
1.4红细胞形态学检查在已制备好的新鲜染色血涂片上行瑞氏染色，以镜检法观察红细胞体积和形态的变化。红细胞形态的变化可作为地中海贫血的初步判断依据，大小形态延长或大小不一的红细胞则可能考虑为地中海贫血患者。
1.5辅助检查测定血清中铁含量，排除缺铁性贫血患者；辅助X线检测胎儿骨骼形态、骨髓腔的变化等。, 百拇医药(黄莲芬)
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