红霉素对支气管哮喘儿童Th1/Th2细胞及T淋巴细胞凋亡的调控研究(2)
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参见附件。
2.2 采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测sFas/sFasL水平：用抗人Fas/Apo-1(或FasL)单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的Fas/Apo-1(或FasL)与单抗结合，加入生物素化的抗人Fas/Apo-1(或FasL)抗体，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入酶底物OPD，出现黄色，加终止液硫酸，颜色变深，在492nm处测OD值，Fas/Apo-1(或FasL)浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Fas/Apo-1(或FasL)浓度。
2.3 采用吖啶橙-溴化乙锭染色法分别检测培养0、48小时检测T淋巴细胞凋亡率：取淋巴细胞悬液25ul加2ul染液(吖啶橙100ug/ml，溴化乙锭100ug/ml，用PBS配制混匀)静止10分钟，取10ul于玻片上，荧光镜观察淋巴细胞，呈现核固缩，沿核膜点块状、新月状或杆状改变者为凋亡细胞，计数200个细胞并计算出凋亡细胞百分率。
3.统计学处理方法：采用SPSS12.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差(x±S)表示，两均数比较采用t检验，P<0.05为差别有统计学意义，P<0.01为差别有显著统计学意义。
结果
1.治疗与对照组Th1、Th2及Th1/Th2检测结果，见表1。
2.治疗组与对照组T淋巴细胞凋亡率检测结果，见表2。 培养0小时及48小时两组比较，哮喘组均明显高于对照组，差异有显著统计学意义(P<0.01)，见表2。
3.治疗组与对照组血清sFas、sFasL检测结果，见表3。 治疗组均明显高于对照组，差异有显著统计学意义(P<0.01)，见表3。
讨论
任何类型的哮喘病的基本病理变化都是一种气道炎症性改变，这种非特异的气道炎症是引起患儿气道高反应性、通气功能障碍及临床症状的关键因素 ......
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