吕晨，陈鑫，朱雄白，林文军，王路，黄正湘，杨胜武

    (温州医科大学附属第一医院 骨科，浙江 温州 325015)

    ·论 著·

    miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制

    吕晨，陈鑫，朱雄白，林文军，王路，黄正湘，杨胜武

    (温州医科大学附属第一医院 骨科，浙江 温州 325015)

    目的：探讨miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制。方法：培养人正常成骨细胞系hFOB 1.19和人骨肉瘤细胞系U2OS，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)比较2组细胞miR-21的表达差异。通过miR-21-up慢病毒感染U2OS细胞，qRT-PCR检测感染前后U2OS细胞中miR-21的表达变化。Transwell侵袭实验检测miR-21对U2OS细胞侵袭的影响，并通过Western blot检测验证在U2OS细胞中miR-21对于靶基因PTEN是否具有调控作用及miR-21对U2OS细胞中侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。结果：qRT-PCR结果表明miR-21在骨肉瘤细胞系U2OS中高表达(P<0.05)。Transwell检测结果表明上调miR-21的表达能够明显促进U2OS细胞的侵袭(P<0.05)。Western blot检测表明PTEN在骨肉瘤细胞中低表达，且与miR-21表达呈负相关(P<0.05)。miR-21可促进侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05)。结论：miR-21可通过抑制PTEN蛋白的表达，进而促进侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达，促进人骨肉瘤细胞系U2OS的侵袭。

    miR-21；骨肉瘤；PTEN；基质金属蛋白酶；侵袭

    骨肉瘤是一种好发于儿童和青少年的骨原发性恶性肿瘤，约占儿科肿瘤的5%[1]，男性发病率略高于女性。骨肉瘤好发于长管状骨的干骺端，以股骨远端和胫骨近端最多见。骨肉瘤恶性程度高，预后极差。近年来，随着辅助检查和手术技术的提高，特别是新的化疗药物的使用，骨肉瘤5年生存率从20%提高到70%。然而，由于骨肉瘤早期就可出现肺部转移，临床单纯骨肉瘤截肢术后患者的5年生存率仍然不容乐观[2-3]。目前，骨肉瘤侵袭和转移的具体分子机制仍未明确。因此，迫切需要寻找一种新的可以预测肿瘤进展的有效分子标记物，探讨其作用机制，并用于指导临床预后。

    microRNA(miRNA)是一类存在于动植物以及病毒中可调控基因表达的内源性非编码单链小分子RNA，长21～23个核苷酸 ......