激发：局部诱导阶段后15d，将约2.5cm×2.5cm大小的吸收性纱布块分别置于试验样品浸提液、阴性对照液及阳性对照液中浸透后，分别局部贴敷于诱导阶段未试验部位(每只动物的上腹部)。用封闭式包扎带固定，并于24h后除去包扎带和敷贴片。

    观察：除去敷贴片后24h和48h观察试验组和对照组动物激发部位皮肤，参照GB/T 16886.10 Magnusson和Kligman分级标准(见表1 示)对每一激发部位和每一观察时间皮肤红斑和水肿反应进行分级并记录。

    结果评价：阴性对照组动物等级小于1，而样品组中等级大于或等于1时一般提示致敏。如阴性对照组动物等级大于或等于1时，样品组动物反应超过阴性对照组中最严重的反应则认为致敏。

    2.2皮内反应试验

    备皮：取健康家兔3只，试验前4h在脊柱两侧各剪剃约10cm×15cm区域兔毛，尽量避免机械损伤皮肤，以备注射浸提液。

    给药：在每只兔脊柱一侧的前5个点皮内注射0.2mL极性溶剂制备的样品浸提液，同一侧的后5个点皮内注射0.2mL非极性溶剂制备的样品浸提液;在每只兔脊柱另一侧的前5个点皮内注射0.2mL极性溶剂对照液 ......