胰岛素生物检定法
http://www.100md.com
《仪器分析法概述》
药品生物试验 | |||
| 洋地黄生物检定法 | 肝素生物检定法 | 胰岛素生物检定法 | 绒促性素生物检定法 |
| 硫酸鱼精蛋白生物检定法 | 抗生素微生物检定法 | 升压物质检查法 | 毒性实验 |
| 局部剌激实验 | 溶血实验 | 过敏实验 | |
, 百拇医药
胰岛素生物检定法
本法系比较胰岛素标准品(S)与供试品(T)引起小鼠血糖下降的作用，以测定供试品的效价。
标准品溶液的配制
精密称取胰岛素标准品适量,按标示效价，加入每100ml中含有苯酚0.2g并用盐酸调节pH值为2.5的0.9%氯化钠溶液，使溶解成每1ml中含20单位的溶液，分装于适宜的容器内，4～8℃贮存，如无沉淀析出，可在3个月内使用。
标准品稀释液的配制
试验当日，精密量取标准品溶液适量，按高低剂量组(ds<[2]>、ds<[1]>)加0.9%氯化钠溶液(pH2.5)配成两种浓度的稀释液,高低剂量的比值(r)不得大于1:0.5。高浓度稀释液一般可配成每1ml中含0.06～0.12单位，调节剂量使低剂量能引起血糖明显下降，高剂量不致引起血糖过度降低，高低剂量间引起的血糖下降有明显差别。
, 百拇医药
供试品溶液与稀释液的配制
按供试品的标示量或估计效价(A<[T]>)，照标准品溶液与其稀释液的配制法配成高、低两种浓度的稀释液，其比值(r)应与标准品相等,供试品和标准品高低剂量所致的反应平均值应相近。
检定法
取健康无伤、同一来源、同一性别、出生日期相近的成年小鼠，体重相差不得超过3g，按体重随机分成4组，每组不少于10只,逐只编号,各组小鼠分别自皮下注入一种浓度的标准品或供试品稀释液，每鼠0.2～0.3ml，但各鼠的注射体积(ml)应相等。注射后40分钟，按给药顺序分别自眼静脉丛采血，用适宜的方法，如葡萄糖氧化酶-过氧化酶法测定血糖值。第一次给药后间隔至少3小时,按双交叉设计，对每组的各鼠进行第二次给药，并测定给药后40分钟的血糖值。照生物检定统计法(附录Ⅹ
Ⅳ)中量反应平行线测定双交叉设计法计算效价及实验误差。
, 百拇医药
本法的可信限率(FL%)不得大于25%。
绒促性素生物检定法
本法系比较绒促性素标准品(S)与供试品(T)对幼小鼠子宫增重的作用，以测定供试品的效价。
标准品溶液的配制 试验当日,按绒促性素标准品的标示效价加0.9%氯化钠溶液配成每1ml中含10单位的溶液，充分溶解后，再用0.5%羧甲基纤维素钠溶液按高、中、低剂量组(ds<[3]>、ds<[2]>、ds<[1]>)配成三种浓度的稀释液，相邻两浓度之比值(r)应相等，且不得大于1∶0.5。
一般高浓度稀释液可配成每1ml中含0.3～0.8单位。调节剂量使低剂量组子宫较正常子宫明显增重,高剂量组子宫增重不致达到极限。稀释液置4～8℃贮存，可供3日使用。
供试品溶液的配制
, http://www.100md.com
按供试品的标示量或估计效价(A<[T]>)，照标准品溶液的配制法配成高、中、低(dT<[3]>、dT<[2]>、dT<[1]>)三种浓度的稀释液,相邻两浓度之比值(r)应与标准品相等，供试品与标准品各剂量组所致反应平均值应相近。
检定法 取健康无伤、出生17～23日、体重9～13g、同一来源的雌性幼小鼠，一次实验所用幼小鼠的出生日数相差不得超过3日，体重相差不得超过3g；按体重随机分成6组，每组不少于15只。每日于大致相同的时间分别给每鼠皮下注入一种浓度的标准品或供试品稀释液0.2ml，每日一次，连续注入3次，于最后一次注入24小时后,将动物处死,称体重，解剖，于阴道和子宫交接处剪断，摘出子宫，剥离附着的组织，去掉卵巢，压干子宫内液，直接称重(精密至0.5mg)并换算成每10g体重的子宫重,照生物检定统计法(附录Ⅹ Ⅳ)中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。
本法的可信限率(FL%)不得大于25%。, 百拇医药