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编号:193852
局部剌激实验
http://www.100md.com 《仪器分析法概述》
    


    药品生物试验
洋地黄生物检定法肝素生物检定法胰岛素生物检定法绒促性素生物检定法
硫酸鱼精蛋白生物检定法抗生素微生物检定法升压物质检查法毒性实验
局部剌激实验溶血实验过敏实验

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    局部剌激实验

    (一)家兔点眼法

    取家兔5只,将药液生理盐水各0.05-0.1

    ml,分别滴入左右此结膜襄内(或注入眼球结膜下),观察数小时(对有剌激性药物应观察至作用完全消失,结膜恢复正常),与对照眼比较,观察结膜有无充血,水肿、眼分泌物增多,能否恢复等情况。如2只免以上均有上述症状表示有剌激作用,观察项目如下:

    水泡:眼皮内有小水泡凸起。

    分泌物:积存于眼内外两侧眼角。

    红肿:眼皮内表皮红肿。

    充血:眼结膜有血丝或全部发红。
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    流泪:内眼留有泪珠,严重者成线状滴下。

    羞明:怕光,眼晴紧闭。

    (二)腿肌注射法

    家兔、大鼠、小鼠均可供试。取药液1ml,分别注入家免左右后腿四头肌部位(小鼠注0.1ml,大鼠注0.2ml)24小时或48小时后,纵向切开注射部位肌肉,观察局部有无充血、水肿、变性或坏死等现象,必要时取小块组织做理切片检查。如局部组织有严重炎症反应,则不宜做注射或粘膜、创伤面给药。

    (三)兔耳皮下注射法

    将药液和生理盐水各0.05-0.1ml,分别皮下注射至家兔左右耳壳内(注射时要避开小血管),观察局部有无剌激现象或硬结、坏死等,至作用完全消失,注射部位愀复正常为止。

    溶血实验
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    (一)2%红细胞生理盐水混悬液制备

    取动物新鲜血液,加入装有玻璃的三角烧瓶中,振摇数分钟或用玻璃棒搅拌,除去纤维蛋白原,用生理盐水冲洗,离心2-3次,至上清液不呈红色为止。然后按红细胞的理用生理盐水配成2%的混悬液。

    (二)试验方法

    取干净试管6支,按表排列,依次分别加入各种溶液,摇匀,置37C0恒湿箱中(或25C0-27C0室温中)并分别观察,记录1/2、1、2、3小时的结果,如溶液变清呈红色,则表示溶血,必要时用显微镜观察红细胞是否破裂。如供试药液0.3m在半小时内引起容血即不宜做静脉注射用。3小时不引起溶血作为合格。当结果难以判定时,可结合毒性、剌激性与疗效等全面考虑是否可供试注射用。

    溶血试验记录表

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    试管(号)


    1


    2


    3


    4


    5


    6


    供试药液(ml)


    0.1


    0.2

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    0.3


    0.4


    0.5


    空白(对照)


    生理盐水(ml)


    2.4


    2.3


    2.2


    2.1


, 百拇医药     2.0


    2.5


    2%红细胞混悬液(ml)


    2.5


    2.5


    2.5


    2.5


    2.5


    2.5


    过敏实验
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    药物的过敏反应系人体对药物的一

    特殊反应。这种反应与药物的治疗作用和毒副作用,以及药物剂量的大小有直接关系,如青霉素对多数人并不产生毒副作用,但对少数人却能引起严重的过敏反应,药物的过敏性反应是机体对药物的一种变态反应。当机体接受某些药物或其他杂质(抗原)后,在机体内产生了相应的抗体,这时机体对这种抗原的敏感性增高,若机体再接受(口服、吸入、注射、粘膜吸收、皮肤接触等)这种药物或杂质时,即作为抗作与机体的抗体发生原抗反应。这种由于药物所引起的变态反应,称为药物的过敏反应。

    (一)实验方法

    取体重250-350g的健康豚鼠6只,每鼠隔日腹腔注射药液0.5ml,共注射3次。自第一针起14日后,由股静脉或颈静脉注射药液1ml,或腹腔注射2ml。观察注射后有无喷嚏、抽搐、休克等过敏反应,结果为阴性时,隔7日后再由静脉注射原药液1

    ml或腹腔注射2 ml,观察有无过敏反应。

    (二)结果判断

    注射液后15分钟内,若无连续干咳、抓鼻及明显竖毛、四肢发软、躺卧、呼吸困难、痉挛、虚脱或死亡等症状(或仅有1只豚鼠前爪抓鼻和干咳均不超过3次),作为阴性反应;若有1只鼠出现痉挛、虚脱及死亡或1只以上豚鼠出现干咳,前爪抓鼻,竖毛,四肢发软、吸收困难等一种以上症状,则作为阳性的反应。

    【注】过敏试验所试动物,一般选用豚鼠,因豚鼠对变态反应较敏感,症状也较典型。, 百拇医药