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广州科学家培育出“器官种子”
http://www.100md.com 2002年10月18日 广州日报
     2001年7月,中山大学附属第二医院黄绍良教授领导的实验小组,利用试管婴儿父母捐赠的受精卵,开始了人的胚胎干细胞建系。

    克隆细胞培养40代

    黄绍良教授和助手何志旭博士把受精卵放在培养液中,7天后,部分受精卵发育成囊胚。去除囊胚透明带,用一个很细的器械插进囊胚,共得到5个内细胞团,分散接种在小鼠胚胎做成的纤维细胞饲养层上,饲养层的表面看起来像麻袋一样凹凸不平。

    在饲养层上养5天后,有3个内细胞团存活,它们开始克隆性生长,克隆细胞团像蘑菇一样,呈椭圆形。何博士不断地取出克隆细胞,再放在新的饲养层上,一代一代地接着往下培养。他们将3个细胞系分别命名为 C HE1、CHE2、CHE3,截至目前CHE3已传了近40代,CHE1传了36代,CHE2传了32代,细胞克隆性增长很活跃,并连续传代7个月。

    老鼠皮下长出人的软骨
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    怎么确定这三组克隆细胞系就是具有分化成任何类型组织的胚胎干细胞呢?研究者对这些胚胎克隆细胞进行了功能鉴定。他们用注射器分别将三组克隆细胞注射进有免疫缺陷的小老鼠的皮下,10天后,老鼠注射部位的皮肤开始隆起,长出黄豆大小的包块,包块软软的,越长越大。又过了32天,切开包块发现,里面是一个个畸胎瘤,约有一般的土豆大,里面全是人的软骨、神经管、横纹肌和骨骼等,它们毫无规则地在长在一起。

    从畸胎瘤的情况来看,这三组细胞系确实处于原始状态,长期传代后还保持胚胎干性,具有分化成所有组织的能力,是胚胎干细胞。这项实验表明中国人的胚胎干细胞首次建系成功,同时也标志着中国的胚胎干细胞研究进入世界最先进行列,目前世界上只有包括中国在内的8个国家掌握了这项技术。

    中山大学附二医院干细胞研究所决定做动物实验,将老鼠的胚胎干细胞定向分化成造血干细胞,重建造血功能,为将人的胚胎干细胞定向分化为造血干细胞做实验准备。7只小鼠经射线照射后,骨髓被完全摧毁,血液中的白细胞和红细胞大量减少。它们在实验室的笼子里蜷成一团,毛发失去了光泽,处于极度衰竭状态,如果不进行造血干细胞移植的话,很快就会死亡。
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    何博士分别给3只小鼠注射了由小鼠胚胎干细胞定向分化得到的造血干/祖细胞,第7天开始,3只小鼠的病情有了好转。实验第20天,将它们的血液抽出来化验,发现白细胞和红细胞逐渐增多,40多天时,3只小鼠恢复到正常水平。而没做造血干/祖细胞移植的4只小鼠很快就死亡了。

    “种子细胞”构建人皮肤

    黄绍良教授表示,中国人胚胎干细胞首次建系、动物实验造血干细胞定向诱导并成功重建造血功能,有了动物实验的基础,下一步就是把人的胚胎干细胞进行定向诱导成需要的干细胞,用于临床医学。

    何志旭博士说,目前治疗白血病面临配型困难、来源有限等问题。如果把白血病儿童的父母的受精卵胚胎干细胞定向诱导成造血干细胞,然后移植到患者体内去,则可以解决临床移植中面临的难题。

    造血干/祖细胞移植可以将恶性肿瘤的治愈几率提高一到数倍。目前人类治恶性肿瘤的主要手段还是放疗、化疗,放、化疗会杀死血液细胞,所以要严格控制剂量,有了定向诱导的造血干细胞移植,医生就可以下狠手杀死肿瘤细胞了。

    中国人的胚胎干细胞建系成功,打破了少数几个国家对人的干细胞研究的垄断,它可以作为组织工程的“种子细胞”,构建人的皮肤、角膜、肝脏;在生物制药方面,可以把特异的基因转到胚胎干细胞,跟正常的胚胎融合,嵌到正常胚胎个体中,如生产出含有特殊基因的牛奶治病。

    胚胎干细胞建系:把胚胎干细胞长时间传代培养,获得大量的胚胎干细胞,使之成为一个细胞库,要用就随时可取。, 百拇医药