孕早期胎儿脐带血中的Cd34+细胞更适用于基因治疗
摘要：美国研究人员报告，向胎儿脐血中CD34+细胞转基因的效果明显。:732-737)
11月23日华盛顿大学的L.E. Shields博士及同事指出：“逆转录病毒介导的转基因可高效转化胎儿脐血细胞中CD34+细胞。该研究的主要目的是比较孕早期和晚期胎儿脐血CD34+造血干细胞经逆转录病毒介导的转基因的效率。”
研究人员从用荧光活性细胞分类的孕早期和晚期冷冻的胎儿脐血样本中提纯CD34+细胞。然后把CD34+细胞放入含病毒介质的重组人纤溶酶片段CH-296包埋的培养皿中，并加入多种造血生长因子和硫酸鱼精蛋白。生长因子包括白介素6、干细胞因子、粒细胞集落刺激因子、粒-巨噬细胞集落刺激因子和巨核细胞生长发育因子。介质为长臂猿白血病病毒假型株LAPSN 。
48小时内Shields等每12小时改变含病毒的LAPSN 介质。培养末期在软琼脂上可见细胞集落形成。研究人员使用含有人胎盘碱磷酶和新霉素磷酸转移酶基因的长臂猿白血病病毒假型株LAPSN 。他们用组织化学染色法显示热稳定性碱磷酶琼脂上形成集落的细胞，以评估转基因的效率。以被碱磷酶染色形成集落的细胞来确定是否有转基因发生。
研究人员发现孕早期和晚期胎儿脐血CD34+的造血干细胞基因转移率相似，分别为58.4%±11.8%和63.2%±12.5%。
Shields等得出结论：“使用被长臂猿白血病病毒假型株优化的出生后标本，孕中期胎血的CD34+造血干细胞可被高效转化。相对于出生时的脐血，孕早期胎儿循环中CD34+和CD38-细胞数目更多，增殖能力更强，从孕4个月到出生这段时间胎儿造血系统的发育更迅速，所以孕早期更适宜基因治疗。”
“由于转基因至造血干细胞和长期原代培养细胞的体外研究并不能预示体内骨髓细胞的转基因效率，所以应进一步在合适的动物模型中检验基因治疗的临床适用性。”, 百拇医药
11月23日华盛顿大学的L.E. Shields博士及同事指出：“逆转录病毒介导的转基因可高效转化胎儿脐血细胞中CD34+细胞。该研究的主要目的是比较孕早期和晚期胎儿脐血CD34+造血干细胞经逆转录病毒介导的转基因的效率。”
研究人员从用荧光活性细胞分类的孕早期和晚期冷冻的胎儿脐血样本中提纯CD34+细胞。然后把CD34+细胞放入含病毒介质的重组人纤溶酶片段CH-296包埋的培养皿中，并加入多种造血生长因子和硫酸鱼精蛋白。生长因子包括白介素6、干细胞因子、粒细胞集落刺激因子、粒-巨噬细胞集落刺激因子和巨核细胞生长发育因子。介质为长臂猿白血病病毒假型株LAPSN 。
48小时内Shields等每12小时改变含病毒的LAPSN 介质。培养末期在软琼脂上可见细胞集落形成。研究人员使用含有人胎盘碱磷酶和新霉素磷酸转移酶基因的长臂猿白血病病毒假型株LAPSN 。他们用组织化学染色法显示热稳定性碱磷酶琼脂上形成集落的细胞，以评估转基因的效率。以被碱磷酶染色形成集落的细胞来确定是否有转基因发生。
研究人员发现孕早期和晚期胎儿脐血CD34+的造血干细胞基因转移率相似，分别为58.4%±11.8%和63.2%±12.5%。
Shields等得出结论：“使用被长臂猿白血病病毒假型株优化的出生后标本，孕中期胎血的CD34+造血干细胞可被高效转化。相对于出生时的脐血，孕早期胎儿循环中CD34+和CD38-细胞数目更多，增殖能力更强，从孕4个月到出生这段时间胎儿造血系统的发育更迅速，所以孕早期更适宜基因治疗。”
“由于转基因至造血干细胞和长期原代培养细胞的体外研究并不能预示体内骨髓细胞的转基因效率，所以应进一步在合适的动物模型中检验基因治疗的临床适用性。”, 百拇医药
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