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编号:6727
检测磷酸肌醇的探针蛋白
http://www.100md.com 2001年3月1日 中国生物信息
     许多年前,当研究者们试图找到一种调控蛋白的蛋白因子时,他们意外的发现此因子并非蛋白而是磷酸肌醇。因此,很多实验室都对磷酸肌醇或多或少产生了兴趣。

    EMBO J 最近的一篇文章,Harald Stenmark and Rob Parton设计了一种全新的探针用来研究phosphatidylinositol-3-phosphate (PtdIns(3)P)的胞内定位。

    PI3K作用的产物在信号传导的过程中广泛存在。产物之一PtdIns(3)P主要在模运输过程中发挥作用,被认为调控很多物种的胞饮过程。PtdIns(3)P的一个活性是可以将包含FYVE

    finger domain的蛋白招募至膜上。

    Gillooly et al.认为,既然IP与FYVE finger domain相结合,那么探针蛋白也应具有此结构域。他们将Hrs一个胞饮过程中的蛋白嵌入两个FYVE

    domain 命名为2XFYVE。一系列的对照实验证明2XFYVE仅与IP结合,而且此探针蛋白与内源性的PtdIns(3)P–binding蛋白相互竞争,还可用免疫荧光技术,免疫电镜技术加以检测。

    一个已知的FYVE finger蛋白EEA1是只定位在早期包含体上的,同时PtdIns(3)P也定位于早期包含体上。用2XFYVE证明了这一观点。研究者们接着发现,2XFYVE显示PtdIns(3)P也定位于晚期包含体多囊泡的内膜上,这说明包含PtdIns(3)P的膜应该是包含体膜内陷而形成。这就使PtdIns(3)P不能再招募诸如EEA1之类的蛋白。此发现的意义还在研究,但此新技术无疑已为我们研究PtdIns(3)P开辟了新的道路。

    相关文章:

    ORIGINAL RESEARCH PAPER

    Gillooly, D. J. et al. Localization of phosphatidylinositol 3-phosphate in

    yeast and mammalian cells. EMBO J. 17 , 4577–4588 (2000) [ PubMed]

    FURTHER READING

    Corvera, S., D'arrigo, A. &

    Stenmark, H. Phosphoinositides in membrane traffic . Curr. Opin. Cell

    Biol. 11, 460– 465 (1999) PubMed, 百拇医药