·论著·

    先天性尿道下裂与 SRD5A2 及 SRY

    基因突变关系研究

    周李 梅骅 刘唐彬 光炜

    【摘要】 目的 探讨中国人先天性尿道下裂的发生与 5 α 2还原酶 2 (SRD5A2)基因突变及 SRY基因突

    变的关系。方法 收集先天性尿道下裂患儿静脉血 23 例 ,抽提 DNA。经 PCR分别扩增 SRD5A2 基因的

    第 1 至第 5 外显子及 SRY基因的 DNA片段。对各扩增片段采用单链构象多态性诊断法( PCR2SSCP) ,筛

    选基因突变标本 ,有电泳异常的标本进行测序分析。结果 经 PCR2SSCP发现3 例 SRD5A2基因的第4 外

    显子 DNA扩增片段电泳带位置异常 ,经 DNA序列分析证实 2 例为纯合子型第 227 位密码子由 CAA 替代

    CGA(Arg227Gln) ;1 例为双重杂合子型突变 ,第 227 位密码子由 CAA 替代 CGA ,同时第 186 位密码子由

    TTG替代 TTT(Phe186Leu) 。PCR2SSCP检测 SRY基因片段未发现异常电泳带。结论 SRD5A2 基因突

    变 ,可能是先天性尿道下裂的病因之一 ,SRD5A2基因的第 227位密码子可能为中国人该基因的突变热点 ,而尿道下裂中 SRY基因的突变少见。

    【关键词】 尿道下裂 SRD5A2基因 SRY基因 男性假两性畸形

    Identif ication of mutations of SRD5A2 gene and SRY gene in patients with hypospadias ZHOU L i

    3

    , M EI

    Hua , L IU Tangbin , GUA N G Wei . 3 Department of Pediat ric S urgery , the Fi rst A f f il iated Hospi tal of S un

    Yat2Sen Universi ty of Medical Sciences , Guangz hou , 510080 P. R. China. E2mail : L iz hou @Gzsums. edu.

    cn

    【Abstract】 Objective To identify possible molecular mechanism underlined hypospadias and any relation2

    ship of the mutations of SRD5A2 gene and SRY gene to hypospadias. Methods Twenty2three blood samples

    f rom the patients with hypospadias were obtained f rom Aug. 1996 to Jan. 1998. DNA was ext racted f rom blood

    leukocytes. Exons 1 to 5 of the SRD5A2 gene and exon of the SRYgene were amplified by PCR. Mutation de2

    tection was performed using PCR2SSCP/ silver staining and direct DNA sequencing. Results In 3 cases (named

    5R22China21 ,5R22China22 ,and 5R22China23) , DNA sequencing revealed that a homozygous change f rom nu2

    cleotide G to A occurred in 5R2 2China21 and 2 , leading to a substitution of glutamine to arginine in the codon 227

    (Arg 227 to Gln) . In the third patient (5R22China23) , DNA sequencing revealed two different heterozygous

    mutations (Arg 227 to Gln , Phe 186 to Leu) in exon 4 of the SRD5A2 gene. No mutation of SRY gene was

    found in all patients. Conclusion The mutation of SRD5A2 gene affects the differentiation of the external geni2

    talia and may play a role in the etiology of hypospadias. Since no mutation of SRY gene was found , this study

    might suggest that the mutation of SRYgene is not an important event in hypospadias. Condon 227 is a hots pot

    site of mutation within the gene. The mutation of codon 186 ( Phe 186Leu) represents a new form of SRD5A2

    mutation.

    【Key words】 Hypospadias SRD5A2 gene SRY gene Male pseudohermaphroditism

    有关先天性尿道下裂的病因目前仍未完全明了。

    雄激素分为睾酮( T)和双氢睾酮(DHT) 。DHT 是由

    胎儿睾丸分泌的睾酮在靶细胞的 5 α 2还原酶的催化作

    用下转化而来。T主要诱导中肾管(Wolffian duct s)的

    男性化,形成精囊、输精管和附睾。而DHT则依次诱导

    外生殖器、尿道和前列腺的形成。故阴茎的发育主要是

    作者单位:510080 广州,中山医科大学第一附属医院小儿外科(周

    李、刘唐彬) ,泌尿外科(梅骅) ,医学遗传学研究室(光炜)

    DHT的作用。5 α 2还原酶的作用下降将影响 DHT 的

    合成 ,从而影响尿道和外生殖器的形成[123 ]。因此 ,近

    年来 5 α还原酶基因突变与先天性尿道下裂关系的研

    究成为一个新的热点[427 ]。SRY基因是与性别分化相

    关的基因。亦有报道认为 SRY基因的突变可能与尿

    道下裂发生有关[8 ]。

    1 材料与方法

    1. 1 研究对象 随机收集 1996 年 8 月至 1998 年 1

    · 113 · 中华医学遗传学杂志1999 年10 月第16 卷第5 期 Chin J Med Genet , October 1999 , Vol . 16 , No. 5

    ? 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.月间在我校第一附属医院小儿外科住院的尿道下裂患

    者 23 例。

    1. 2 寡核苷酸引物序列 按文献 [ 9 , 14 ] 合成

    SRD5A2基因寡核苷酸引物和 SRY基因寡核苷酸引

    物。SRD5A2 基因引物在加拿大合成 ,SRY基因引物

    由中国科学院上海细胞所肿瘤研究所合成。

    1. 3 实验方法[9 ]

    1. 3. 1 DNA提取 按常规方法提取患者外周血白细

    胞基因组DNA(酚提法) ......