破解中药复方的密码 麝香保心丸物质基础研究初步发现——“十一五”国家科技支撑计划重点项目简介
 |
 |
 |
 |
作为治疗冠心病的常用中成药,近年药理学研究已经逐步明确了麝香保心丸扩张冠状动脉、保护血管内皮、抗炎、调节血脂、稳定斑块、促进血管新生等作用。临床用于治疗心肌缺血引起的心绞痛、胸闷、心肌梗死等疾病取得了良好效果,能够快速缓解心绞痛发作、抑制动脉粥样硬化发展,长期使用可减少心血管事件的发生危险,且不良反应少见,临床得以广泛应用。
中药复方的作用优势在于多途径、多靶点及多组分的整体作用。2007年2月,美国FDA新发布了一项与中医药密切相关的指导性文件草案——《补充和替代医学产品及FDA管理指南》草案,认同传统中医药学是有理论、有实践的完整医疗体系(Whole Medical Systems)。但依照现代药理学解释中药复方对复杂人体的作用,尚有大量研究需要进行。首先,需要知道中药复方的物质组成;其次,这些物质组成在药物中是否稳定可控;第三,进入人体后代谢情况如何;最后,进入人体的多种物质成分在机体中发挥什么样的生物效应。
在上海市科委“中药现代化专项”基金(04DZ19856)及“十一五”国家科技支撑计划项目(2006 BAI08B04-01 )资助下,由清华大学、第二军医大学、上海和黄药业等单位成立课题组,开展了针对麝香保心丸的深入研究。系列研究包括对麝香保心丸及单味药材进行系统的化学成分分析,为进一步的质量标准及作用机制研究提供物质基础;采用高效液相色谱(HPLC)及气相色谱(GC)对麝香保心丸的指纹图谱进行研究,并建立了多个成分同时定量测定的方法,为完善麝香保心丸产品质量控制体系提供了理论依据;对蟾酥的主要成分进行临床前体内药代动力学研究,为指导临床用药提供了科学依据;初步开展了麝香保心丸系统生物学研究(即生物体系经受复杂的中药物质组扰动后的应答过程和变化规律)。
, 百拇医药
图1 从麝香保心丸中分离得到的部分化合物
图2 麝香保心丸 HPLC-ELSD色谱图
图3 麝香保心丸不同批次指纹图谱相似度
图4 蟾酥主要成分药时曲线图
从麝香保心丸中分离得到95种单一化合物,并运用各种波谱技术鉴定其化学结构
采用经典柱色谱(硅胶、反相硅胶、凝胶、大孔树脂)结合制备、半制备液相色谱和HPLC/质谱(MS)联用技术,对麝香、牛黄及蟾酥等组成药材进行了系统分离和结构鉴定。目前共分离得到95种单一化合物,并运用各种波谱技术[紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、磁共振(1H NMR、13C NMR)、 无畸变极化转移增强技术(DEPT), 二维磁共振技术(HMQC, HMBC, NOESY)]鉴定了其化学结构,其中6种为新化合物(图1)。
, 百拇医药
主要结构类型有人参皂苷、胆汁酸、强心甾、吲哚生物碱、有机酸酯等非挥发性组分和麝香酮类、香脂酸等挥发性组分。麝香保心丸明确的物质组成,为制定中药复方标准、深入开展系统生物学研究奠定了基础。
运用指纹图谱和多成分定量分析评定麝香保心丸的批次稳定性
与其他大多数中药复方一样,2005年版《中国药典》(一部)对于麝香保心丸的质量控制方法只有定性鉴别而无含量测定方法,且只对其中的蟾酥、人参及麝香进行了定性分析。对于一种由7味中药组成的成分复杂的复方,为建立稳定的药物标准,必须建立其中物质成分的量化标准。
麝香保心丸成分性质差异很大,既有挥发性成分,也有非挥发性成分。本研究采用HPLC及GC方法对方中的化学成分进行了定性、定量分析。采用HPLC-蒸发光散射检测(ELSD)法建立了麝香保心丸中主要活性成分的含量测定方法,方法学考察证明该方法可以简便有效地同时测定药材中不同类型的非挥发性化合物(图2)。采用GC法建立了麝香保心丸中挥发性成分的含量测定方法,方法学考察证明该方法可以简便有效地同时测定不同类型的挥发性化合物,为麝香保心丸质量的有效控制奠定了基础。
, http://www.100md.com
建立了麝香保心丸标准的HPLC-ELSD色谱图后,对12批样品色图谱分别使用软件(中国药典委《评价系统》)进行相似度和主成分分析(PCA),发现目前12批成品的相似度范围为0.925~0.981(完全相似定为1)(图3)。不同批次麝香保心丸指纹图谱相似度高,说明不同批次的药物中各种化学物质成分稳定,从而临床疗效、不良反应也很稳定。
蟾酥的药代动力学研究:半衰期较短,长期使用不易蓄积
以往对于蟾酥的研究发现,其具有类似洋地黄的减慢心率、增强心肌收缩力等作用,而洋地黄类药物由于半衰期较长,使其剂量调整复杂、容易产生药物蓄积,从而使临床医生对含有蟾酥类药物安全性产生疑虑。
本研究选择蟾酥中5个含量较高的化合物,对该药的体内动力学、药物代谢及口服生物利用度等情况进行了解,为该药的临床应用提供合理依据。通过对蟾酥中主要成分脂蟾毒配基、华蟾毒精、蟾毒灵、蟾毒他灵、阿端那蟾毒精的药动学研究发现,它们的半衰期(t1/2)都很短(口服t1/2分别为:1.75、3.85、2.58、3.54、2.26小时),每天3次的服用间隔可以保持有效物质浓度且不易蓄积(图4)。
麝香保心丸的物质基础初步明确后,将对其后通过系统生物学及经典药理学研究阐明麝香保心丸的作用机制产生积极意义。由此,期望通过现代医药科学解释中药复方君臣佐使配伍规律。后继的“十一五”国家科技支撑计划项目,将进一步破解麝香保心丸治疗冠心病的密码。, 百拇医药